1999 年度実績報告書

HNF標的遺伝子の同定による糖尿病発症機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号	11470229
研究種目	基盤研究(B)
研究機関	群馬大学
研究代表者	武田純群馬大学, 体調節研究所, 教授 (40270855)
研究分担者	戸村秀明群馬大学, 体調節研究所, 助手 (70217553) 井ノ上逸郎群馬大学, 体調節研究所, 助教授
キーワード	遺伝子変異 / ゲノム / 転写因子 / MODY / マイクロアレイ / インスリン分泌 / 2型糖尿病 / EST
研究概要	転写因子HNF-1αはインスリン合成や分泌に関する重要な遺伝子を転写調節している。本年度では、HNFカスケードに属するHNF-1α標的遺伝子の収集を重点的に行った。この遺伝子プールから有力候補を選択し、次年度以降のMODY患者の遺伝子解析に供する予定である。 (1)膵β細胞株(MIN6)発現遺伝子のEST化とHNF-1α過剰発現による誘導遺伝子の獲得マウスMIN6細胞からmRNAを抽出しcDNAライブラリーを作成した。In vivo excision 法によりライブラリー全体をプラスミドに変換した後、無作為に5,000個以上のクローンを選択してEST化した。得られたEST配列についてデーターベースサーチを行ない、重複しないESTパネルを作成中である。次年度中には一万個を終了してマイクロアレイ化する。 MIN6細胞でHNF-1αを効率よく発現させるためにアデノウイルス発現系を用いた。アデノコンスラクトを同細胞に感染させてHNF-1αを過剰発現させると、標的遺伝子mRNA全体のレベルを上昇させることができる。本年度は、このアデノ発現ベクターの構築に成功した。 (2)対応するヒト膵ラ氏島ESTパネルの作成ヒト膵ラ氏島cDNAライブラリーから既に1万個のESTを獲得している。上記と同様にデータベースサーチを行ない、重複しないヒトESTパネルを作成した。このパネルは、HNF-1α過剰発現で発現レベルが変化するマウス遺伝子に対応するヒト遺伝子の獲得に用いる。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] S.Yamada et al.: "Inkentification of mutations in the hepatocyte nuclear factor-1α gene in Japanese subjects with early-onset NIDDM and functional analysis of the mutant proteins"Diabetes. 48. 645-648 (1999)
[文献書誌] H.Tomura et al.: "Loss-of-function and dominant negative mechanisms associated with hepatocyte nuclear factor-1β mutations in familial Type 2 diabetes mellitus"J. Biol. Chem. 274. 12975-12978 (1999)
[文献書誌] S.Yamada et al.: "Cloning of cDNA and the gene encoding human hepatocyte nuclear factor(HNF)-3β and mutation screening in Japanese subjects with MODY"Diabetologia. 43. 121-124 (2000)
[文献書誌] Q.yang et al.: "Structure/function studies of hepatocyte nuclear factor-1α,a diabetes-associated transcription factor"Biochem.Biophys Res. Commun.. 266. 196-202 (1999)
[文献書誌] H.Mashima et al.: "Genes expressed during the differentiation of pancreaticAR42J cells into insulin-secreting cells"Diabetes. 48. 304-309 (1999)
[文献書誌] 武田純他: "HNF-1β異常型糖尿病に合併した種々の病態/A263fsinsGG家系の件等"Diabetes Fronties. 10. 891-894 (1999)

1999 年度 実績報告書

HNF標的遺伝子の同定による糖尿病発症機構の解明

研究代表者

武田 純 群馬大学, 体調節研究所, 教授 (40270855)

研究成果

[文献書誌] S.Yamada et al.: "Inkentification of mutations in the hepatocyte nuclear factor-1α gene in Japanese subjects with early-onset NIDDM and functional analysis of the mutant proteins"Diabetes. 48. 645-648 (1999)

[文献書誌] H.Tomura et al.: "Loss-of-function and dominant negative mechanisms associated with hepatocyte nuclear factor-1β mutations in familial Type 2 diabetes mellitus"J. Biol. Chem. 274. 12975-12978 (1999)

[文献書誌] S.Yamada et al.: "Cloning of cDNA and the gene encoding human hepatocyte nuclear factor(HNF)-3β and mutation screening in Japanese subjects with MODY"Diabetologia. 43. 121-124 (2000)

[文献書誌] Q.yang et al.: "Structure/function studies of hepatocyte nuclear factor-1α,a diabetes-associated transcription factor"Biochem.Biophys Res. Commun.. 266. 196-202 (1999)

[文献書誌] H.Mashima et al.: "Genes expressed during the differentiation of pancreaticAR42J cells into insulin-secreting cells"Diabetes. 48. 304-309 (1999)

[文献書誌] 武田純 他: "HNF-1β異常型糖尿病に合併した種々の病態/A263fsinsGG家系の件等"Diabetes Fronties. 10. 891-894 (1999)

1999 年度実績報告書

武田純群馬大学, 体調節研究所, 教授 (40270855)

[文献書誌] 武田純他: "HNF-1β異常型糖尿病に合併した種々の病態/A263fsinsGG家系の件等"Diabetes Fronties. 10. 891-894 (1999)