おとり遺伝子を用いた変形性関節症における新規の遺伝子治療法の開発と応用

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11470440
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 竹之下 康治 九州大学, 歯学研究院, 助教授 (50117157)
• 研究分担者: 窪田 泰孝 九州大学, 歯学研究院, 助手 (60205151) ; 中川 和憲 九州大学, 医学研究院, 講師 (50217668) ; 石橋 浩晃 九州大学, 歯学研究院, 助手 (90254630)
• キーワード: 顎関節 / 細胞外基質 / 遺伝子治療

研究概要

1)細胞培養実験により各種サイトカイン刺激が与えるuPA,MMPsの発現状況の解析
関節軟骨由来細胞におけるTNFα刺激がuPA,MMPs産生に与える影響を検討した.TNFαにより軟骨由来細胞のuPA,MMP-1の発現が亢進することを解明した.
2)サイトカイン刺激による基質破壊産生亢進に関与する転写因子の解明
関節軟骨細胞をTNFαで刺激すると,転写囚子NF-kB,Sp1の活性化がみられることを,バンドシフトアッセイにより確認した.
3)おとり遺伝子導入条件の確立
NF-kB,Sp1を標的とした合成オリゴヌクレオチド(おとり遺伝子)を,HVJ-リポソーム法を用いて,関節軟骨細胞に100%導入できる条件を確立した.
4)おとり遺伝子導入によるuPA,MMP-1発現の制御
NF-kB,Sp-1に対するおとり遺伝子を導入し,関節軟骨由来細胞のuPA,MMP-1産生を抑制できることを解明した.

研究成果

• [文献書誌] Ishibashi H, et al.: "Sp1 Decoy Transfected Cells Suppresses the Expression of VEGF, TGF β1, and Tissue Facotr and also Cell Grwoth and Invasion Activites."Cancer Research. 60. 6531-6536 (2000)
• [文献書誌] Ishibashi H, et al.: "Hypoxia-Induced Angiogenesis of Cultured Human Salivary Gland Carcinoma Cells Involves Enhancement VEGF Production and bFGF Release."Oral Oncology. (発表予定).
• [文献書誌] Nakagawa K, et al.: "Angiogenesis and Its Regulation ; Role of VEGF."Semin Thromb Hemost.. 143. 201-206 (2000)
• [文献書誌] Kubota Y, et al.: "Interleukin-1 α-dependent Regulation of Matrix Metalloproteinase-9 (MMP-9) Secretion and Activation in the Epithelial Cells of Odontogenic Jaw Cysts."Journal of Dental Research. 79(6). 1423-1430 (2000)