| 研究課題/領域番号 |
11470446
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 研究機関 | 東北大学 |
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研究代表者 |
坂本 征三郎 東北大学, 歯学部, 教授 (00235178)
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| 研究分担者 |
松坂 朋典 東北大学, 歯学部, 助手 (30292220)
千葉 潤子 東北大学, 歯学部・附属病院, 助手 (50197620)
小澤 雄樹 東北大学, 歯学部・附属病院, 講師 (90125518)
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| キーワード | う蝕 / 遺伝 / ヒトDNA / う蝕活動性試験 / 分子疫学 / DNA抽出 / mutans streptococci / lactobacilli |
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| 研究概要 |
予備実験
1.DNA抽出方法の確認
頬粘膜を綿棒で擦過することにより得られた剥離細胞から、プロティナーゼKとセントリコンを用いて、DNAを抽出することができた。DNA濃度を確認するためパーソナル・スペクトルモニター(APB・GeneQuant pro)で吸光度を測定した。
2.HLAのタイピングに適した検出方法の選択
HLA-DQA1は、AmpliType PM+DQA1、HLA-DQB1は、INNO-LiPA DQB、HLA-DRB1は、 INNO-LiPA HLA-DRB1とHLA-DRBデコーダを用いたところ検出できた。DNAのPCR増幅はサーマルサイクラー(TaKaRa・Thermal Cycler PERSONAL)を用いて行った。
3.被検者の年齢の変更
実施計画で予定していた6〜8歳児数名で、う蝕活動性試験(サリバテスト)を行ったところ、mutans streptococci数とlactobacilli数の測定は変動が少なかったが、全唾液量は変動が大きく一定でなかった。そのため、調査対象年齢を10歳前後に引き上げることにした。
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