学習・記憶機構の機能形態学的研究

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11480228
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 研究機関: 関西医科大学
• 研究代表者: 杉本 哲夫 関西医科大学, 医学部, 教授 (90144352)
• 研究分担者: 加瀬 政彦 関西医科大学, 医学部, 助手 (10309221) ; 宝谷 剛志 関西医科大学, 医学部, 助手 (60241163) ; 大石 仁 関西医科大学, 医学部, 講師 (00252461) ; 佐久間 覚 関西医科大学, 医学部, 助手 (70309227)
• キーワード: 遺伝子 / マウス / ノシセプチン / 学習・記憶機構 / イオンチャネル / cDNAサブトラクション法

研究概要

1.ノシセプチン受容体遺伝子変異マウス(以下変異マウスと略す)に特異的に発現するノシセプチン関連遺伝子の単離
変異マウスのホモ接合体とヘテロ接合体から得た脳トータルRNAを基盤にしてRT-PCRを実施.ついでPCRセレクト法でcDNAサブトラクションとクローニングを行なった.新規遺伝子数個を得た.ノザン法の結果からこれらのcDNAは変異マウスのホモ接合体の脳に強く発現していることが示唆された.それぞれのcDNAの一次構造を解析中である.これらのcDNAの脳内発現と生成存在様式の解明を予定しているが,ノシセプチンシステムとの対応関係に重点を置いて解析する予定である.
2.カルシウムチャネルサブタイプの生成存在様式の分析
ラットのカルシウムチャネルα1GサブタイプのcDNA構造から特異的配列を予測して数種のプライマーを合成.これらのプライマーを用いてRT-PCRを実施.その結果,α1GcDNA断片を得た.これを用いてin situハイブリダイゼーション(ジゴキシゲニンcRNAプローブによる)を行なった.α1GmRNAが海馬をはじめ,大脳皮質,視床,小脳などの脳部位のニューロンに特異的に分布することを見出した.
3.プリオン遺伝子変異マウスとトランスジェニックマウスの組織所見,機能の分析
プリオン蛋白が小脳運動機能とニューロンや軸策の形態の維持に必須であることを示した.

研究成果

• [文献書誌] Miyuki Nishi: "RhoN,a novel small GTP-binding protein expressed predominantly in neurons and hepatic stellate cells."Molec.Brain Res.. 67・1. 74-81 (1999)
• [文献書誌] Toshiaki Minami: "Involvement of primary afferent C-fibers in touch-evoked pain (allodynia) induced by prostaglandin E2"Eur.J.Neurosci.. 11・6. 1849-1856 (1999)
• [文献書誌] Masahiko kase: "Distribution of neurons expressing α1G subunit mRNA of T-type voltage-dependent calcium channel in adult rat central nervous system"Neurosci.Lett.. 268・2. 77-80 (1999)
• [文献書誌] Noriyuki Nishida: "A mouse prion protein (PrP) transgene rescues Purkinje cell degeneration and demyelination in mice deficient for PrP"Lab.Invest.. 79・6. 689-697 (1999)
• [文献書誌] Osamu Minowa: "Altered cochlear fibrocytes in a mouse model of DFN3 nonsyndromic deafness"Science. 285 5432. 1408-1411 (1999)
• [文献書誌] Teizo Ueyama: "Comparative distribution of GABAergic and peptide-containing neurons in the lateral lemniscal nuclei of the rat."Brain Res.. 849・1,2. 220-225 (1999)