研究概要 |
哺乳類の脳・神経系における細胞膜ラフト領域の情報伝達への寄与を解析する目的で,この領域の構成因子の同定と機能解析を行った.この研究において, 1,主要タンパク質の1つであるNAP-22が膜中のコレステロールと結合すること,そしてこの結合がCa^<2+>-カルモジュリンで阻害されることを見い出した.さらに詳細に解析した結果,NAP-22はフォスファチジルコリン存在下においてのみコレステロール結合能を持つことがわかった.さらにNAP-22がリボソーム膜において脂質の不均一分布を誘起することも見い出された.NAP-22の培養細胞での強制発現においてこのタンパク質が膜コレステロールの挙動を制御することを確認した. 2,ラフト局在性の新規細胞接着因子キロンを同定,解析した.続いてキロンとOBCAMの視床下部視交差上核における発現パターンを比較し,さらに塩投与により誘因される構造変化に伴う発現変化を解析した. 3,神経細胞の極性形成とラフトとの関わりを解析する手始めにラフトの主要タンパク質であるNAP-22の極性形成の時間経過における軸索への局在の度合いを培養神経細胞を用いて解析し,このタンパク質の軸索への局在が極性形成後の顕著になることを見い出した.すなわちNAP-22は直接に極性形成に関わるというよりその維持に関与している可能性が高い. 4,三量体Gタンパク質のラフト局在はよく知られているが,低分子量Gタンパク質の内,膜構造の制御因子として知られているRhoファミリーGタンパク質の局在を調べ,Rac1は局在するがRho, Cdc42は局在しないことを見い出した. 5,ウシ副腎髄質のクロム親和細胞中の分泌顆粒の顆粒膜ラフトの構成因子を解析し,V-ATPaseが局在することを見い出した.これはラフトが膜のサイクリングに関与する可能性を示している. このようにラフト構成因子の解析により,ラフトが細胞膜の構造変化やサイクリング,細胞接着,細胞極性の維持等,種々の情報伝達,情報変換の機構に関与することを見い出した.
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