酵母の変異形質に基づく生理活性物質スクリーニング系の構築と利用

2002 年度 研究成果報告書概要

• 研究課題/領域番号: 11556017
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 展開研究
• 研究分野: 応用微生物学・応用生物化学
• 研究機関: 広島大学
• 研究代表者: 宮川 都吉 広島大学, 大学院・先端物質科学研究科, 教授 (10116676)
• 研究分担者: 高橋 英俊 雪印乳業株式会社, 生物科学研究所, 主任研究員 ; 平田 大 広島大学, 大学院・先端物質科学研究科, 助教授 (30243603)
• 研究期間 (年度): 1999 – 2002
• キーワード: 酵母 / カルシニューリン / Ca^<2+>シグナル / 薬剤スクリーニング

研究概要

研究室では1991年に出芽酵母のカルシニューリン(Ca^<2+>依存性プロテインホスファターゼ)触媒サブユニットをコードする遺伝子を世界に先駆けて取得して以来、その生理機能解明および本機構の医薬開発への応用展開に全力を傾注している。その後の研究において、Ca^<2+>シグナル伝達経路はG_2/M期の細胞周期エンジンCdc28/Clbを負に制御するSwe1キナーゼ活性化を通し、M期進入をブロックする機構を発見し、これが細胞周期"チェックポイント機構"として機能する可能性を提示した(Nature,392,303-306(1998))。この成果に基づいて、本経路における変異株を多数取得し解析することにより、チェックポイント機構の全貌解明および生理的意義解明を目指す研究を展開する一方、この経路を利用し新しい発想に基づく生理活性物質スクリーニング系を着想した。本研究により(1)スクリーニング条件の設定および高効率スクリーニング法の開発、(2)微生物培養液からのスクリーニング実施(3)ケミカルライブラリーからのスクリーニングを実施した。それぞれから候補物質が取得されたので、作用部位の特定を行った。さらに詳細な薬剤作用点の決定及び動物試験をする計画である。

研究成果

• [文献書誌] Yuji Miyamoto et al.: "Identification of Saccharomyces cerevisiae isoeucyl tRNA synthetase as target of G_1-specific inhibitor reveromycin A"J. Biol. Chem.. 277. 28810-28814 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Dai Hirata et al.: "Fission yeast Mor2/Cps12, a protein similar to Drosophila Furry, is essential for cell morophogenesis and its mutation induces Weel-dependent G_2 delay"EMBO J.. 21. 4863-4874 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Daisuke Morita et al.: "Rpf2p, an evolutionarily conserved protein, interacts with ribosomal protein L11 and is essential for the processing of 27 SB pre-rRNA to 25 S rRNA"J. Biol. Chem.. 277. 28780-28786 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Koji Kakugawa et al.: "Cloning, characterization, and expression of cDNA encoding a lipase from Kurtzumanomyces sp. I-11"Biosci. Biotechnol. Biochem.. 66. 1328-1336 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Koji Kakugawa et al.: "Purification and characterization of a lipase from the glycolipid-producing yeast Kurtzumanomyces sp. I-11"Biosci. Biotechnol. Biochem.. 66. 978-985 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Koji Kakugawa et al.: "Isolation of yeast Kurtzumanomyces sp. I-11, novel producer of mannosyterythritol lipid"Biosci. Biotechnol. Biochem.. 66. 188-191 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] 下向敦範 ほか: "清酒酵母の研究(分担執筆)"清酒酵母研究会. 8 (2003)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Y. Miyamoto et al.: "Identification of Saccharomyces cerevisiae isoeucyl tRNA synthetase as target of G_1-specific inhibitor reveromycin A"J. Biol. Chem.. 277. 28810-28814 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] D. Hirata et al.: "Fission yeast Mor2/Cps12, a protein similar to Drosophila Furry, is essential for cell morophogenesh and its mutation induces Wee1-dependent G_2 delay"EMBO J.. 21. 4863-4874 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] D. Morita et al.: "Rpf2p, an evolutionary conserved protein, interacts with ribosomal protein L11 and is essential for the processing of 27 SB pre-rRNAto 25 S rRNA"J. Biol. Chem.. 277. 28780-28786 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] K. Kakugawa et al.: "Cloning, characterization, and expression of cDNA encoding a lipase from Kurtzumanomyces sp. I-11"Biosci. Biotechnot. Biochem.. 66. 1328-1336 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] K. Kakugawa et al.: "Purification and characterization of a lipase from the glycolipid-producing yeast Kurtzumanomyces sp, I-11"Biosci. Blotechnol. Biochem.. 66. 978-985 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] K. Kakugawa et al.: "Isolation of yeast Kurtzumanomyces sp. I-11, novel producer of mannosylerythritol lipid"Biosci. Blotechnol. Biochem.. 66. 188-191 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Masaki Mizunuma et al.: "GSK-3 kinase Mck1 and calcineurin coordinately mediates Hsl1 down-regulation by Ca^<2+> in budding yeast."EMBO J.. 20. 1074-1085 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] X. Zhang et al.: "Crosstalk between transcriptipnal regulators in multidrug resistance in Saccharomyces cerevisiae"J. Biol. Chem.. 276. 8812-8819 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Osamu Tanabe et al.: "Fission yeast homologues of the B subunit of protein phosphatase 2A: multiple roles in mitotic cell division and functional interaction with calcineurin."Gene Cells. 6. 455-473 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Tomonori Hosotani et al.: "PKC1, a protein kinase C homologue of Saccharomyces cerevisiae participates in microtubule function through the yeast EB1 homologue BIM1."Gene Cells. 6. 775-778 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Atsunori Shitamukai et al.: "A positive screening for drugs that specifically inhibit the Ca^<2+>-signaling activity on the basis of the growth promoting effect on a yeast mutant with a peculiar phenotype"Biosci. Biotechnol. Biochem.. 64. 1942-1946 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Masako Suda et al.: "Regulation of Wee1 kinase in response to protein synthesis inhibition"FEBS Letters. 486. 305-309 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Akiko Tsuno et al.: "RRS1, a conserved essential gene, encodes a novel regulatory protein required for ribosome biogenesis in Saccharomyces cerevisiae."Mol. Cell. Biol.. 20. 2066-2074 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Rota Tsujii et al.: "Ebp2, yeast homologue of a human protein that interacts with Epstein-Barr virus nuclear antigen 1, is required for pre-rRNA processing and ribosomal subunit assembly"Genes to Cells. 5. 543-553 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Zhifeng Cui et al.: "Functional analysis of the promoter of the yeast SNQ2 gene encording a multidrug resistance transporter thai confers the resistance to 4-Nitroquinoline N-Oxide,"Biosci, Biotechnol. Biochem.. 63. 162-167 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Ileana Cornelia Farcasanu et al.: "Involvement of thioredoxin peroxidase typeII (Ahp1p) of Saccharomyces cerevisiae in Mn^<2+> homeostasis."Biosci. Biotechnol. Biochem.. 63. 1871-1881 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Masako Suda et al.: "Overproduction of elongation factor 1a, an essential translational component, causes aberrant cell morphology by affecting the control of growth polarity in fission yeast"Gene Cells. 4. 517-527 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Masashi Yukawa et al.: "Nps1/Sth1p, a component of an essential Saccharomyces cerevisiae, is required for the maximal expression of early meiotic genes."Gene Cells. 4. 99-110 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より