ヒト・プリオン病患者の血液での感染性の検討

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11557046
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 村本 環 東北大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (40302096)
• 研究分担者: 北本 哲之 東北大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (20192560)
• キーワード: プリオン蛋白 / 遺伝子導入マウス / プリオン感染 / 血液 / ヒト化モデル / 感染力価

研究概要

ヒトのプリオン病患者において、血液でも感染性の有無に決着をつけることは、完全な輸血および血液製剤にとってなくてはならない情報である。事実、英国では新型CJDの存在および発病前のリンパ系の濾胞樹状細胞への異常プリオン蛋白の沈着などから、英国は自国の血液を利用した血液製剤の作製を断念しており、この原因となった牛海綿状脳症はヨーロッパ全域に広がりつつある。我々は、ヒト・プリオンに対して高い感受性を示す遺伝子導入マウスモデルを利用してプリオン病の患者の末梢血液内に感染性が存在するのかを検討するため、限界希釈法を用いたタイトレイションを行った。ヒト化マウスの発病脳を用いて、限界希釈によって感染性をチェックしたところ、10^<-7>希釈の脳乳剤まで発病し、50%の致死量単位はlogタイターで、8.16logLD_<50>/gramであった。このように、高い感受性マウスの開発に成功し、さらに、リンパ組織の濾胞樹状細胞(FDC)を用いたバイオアッセイ法を確立した。このFDCのバイオアッセイ法を利用すると、従来600日必要としたバイオアッセイ法がわずか30日まで短縮されること、さらに英国で問題となっている新型CJDもアッセイ可能なこと、そして、限界希釈による検討を加えた結果10^<-7>希釈でも感染性が検出できることが明らかとなった。つまり、従来のどんなバイオアッセイ法より高い感度でアッセイでき、しかもアッセイ期間の短縮が可能となったのである。今後、このアッセイ法を用いて、ヒトの組織中に含まれる微量な感染性をチェックするとともに、今回の成功を踏まえて、ウシ型のプリオンのアッセイ法に発展させる予定である。

研究成果

• [文献書誌] 田中智之 北元憲利 村本 環 藤井秀治 坂本晴彦 吉田宗平 辻 力 北本哲之: "ヒト型プリオン蛋白のコドン219 polymorphismを認識する新しい単クローン抗体の作製-その診断的価値-"臨床と病理. 19 no.1. 91-93 (2001)
• [文献書誌] Mariko Yamashita, Toru Yamamoto, Kszuto Nishinaka, Fukashi Udaka, Masakuni Kameyama, Tetsuyuki Kitamoto: "Severe brain atrophy in a case of thalamic variant of sporadicCJD with plaque-like PrP deposition"Neuropathology. 21. 138-143 (2001)
• [文献書誌] Jun Tateishi, Tetsuyki Kitamoto, Shirou Mohri, Sakae Satoh, Tetsuo Sato, Ailsa Shepherd, Malcolm R.Macnaughton: "Scrapie Removal using Planova Virus Removal Filters"Biologicals. 29. 17-25 (2001)