1999 年度実績報告書

ヒト臍帯血からの内皮前駆細胞単離および分化誘導と血管新生療法への応用

研究課題

研究課題/領域番号	11557058
研究種目	基盤研究(B)
研究機関	久留米大学
研究代表者	室原豊明久留米大学, 循環器病研究所, 講師 (90299503)
研究分担者	加藤宏司久留米大学, 医学部, 助手 (70279165) 池田久雄久留米大学, 医学部, 助教授 (50168134)
キーワード	内皮前駆細胞 / 再生医学 / 血管新生 / 幹細胞 / 血管形成 / 動脈硬化 / 臍帯血 / 成人末梢血
研究概要	1.ヒト臍帯血におけるCD34陽性細胞の定量。成人末梢血中細胞数との比較。Flow cytomery法を用い、臍帯血および成人末梢血におけるCD34陽性細胞の定量を行った。我々の結果では、臍帯血は成人末梢血の約10倍量のCD34陽性細胞を有することが明らかとなった。 2.臍帯血からのCD34陽性細胞の単離と内皮前駆細胞への分化誘導。臍帯血より単核球を比重遠心分離法を用いて単離し、抗体ビーズ法を用いCD34陽性単核細胞を分離した。CD34陽性細胞に蛍光色素ラベルを行い、単核球と共培養を行なったところ、CD34陽性細胞から主に内皮前駆細胞が現われた。 3.細胞免疫学的な内皮前駆細胞の同定(表面抗源の発現様式から)。内皮前駆細胞のみに特異的な細胞表面マーカーは明らかにされていないが、表面抗源によってその分化段階ごとの同定が試みられている。内皮前駆細胞は少なくともFlk-1/KDR、VE-cadherin,CD34,CD31などの細胞表面マーカーの発現を有した。 4.内皮前駆細胞は、eNOSを保有し、VEGFに反応してNOを産生した。また、acetyl-LDLの取り込み能を有した。興味深いことに、内皮前駆細胞自身がVEGFを産生することが明らかとなり、VEGF-KDRのオートクライン機構が存在する可能性が示唆された。 5.臍帯血由来内皮前駆細胞の機能評価(in vitro)。臍帯血から得られた内皮前駆細胞が、in vitroにおいて、血管新生反応に関与するか否かを検討する。3次元matrix gel培養系において、血管内皮細胞はnetwork formationを引き起こすが、内皮前駆細胞はこれらのnetwork細胞に組み込まれた。

研究成果

(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Rivard A,Murohara T et al.: "Age-dependent impairment of angiogenesis."Circulation. 99. 111-120 (1999)
[文献書誌] Eguchi H,Ikeda H,Murohara T,et al.: "Endothelial injuries of coronary arteries distal to thrombotic sites: Role of adhesive interaciton between endothlial P-selectin and leukocyte sialyl Lewis^X."Circ.Res.. 84. 525-535 (1999)
[文献書誌] Ikeda H,Ueyama T,Murohara T,et al.: "Adhesive interaction between P-selectin and sialyl lewisX plays an important role in recurrent coronary arterial thrombosis in dogs."Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.. 19. 1083-1090 (1999)
[文献書誌] Murohara T,et al.: "Role of endothelial nitric oxide synthase in endothelial cell migration."Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.. 19. 1156-1161 (1999)
[文献書誌] Murohara T,et al.: "Effects of atrial and brain natriuretic peptides on lysophosphatidylcholine-mediated endothelial dysfunction."J.Cardiovasc.Pharmacol.. 34. 870-878 (1999)
[文献書誌] Murohara,T.,et al.: "Rescue of hypercholesterolemia-indused impairment of angiogenesis by dietary L-arginine."Circulation. 100. I-319 (1999)
[文献書誌] 室原豊明、池田久雄、今泉勉: "医学のあゆみ"医歯薬出版株式会社. (1999)
[文献書誌] 新谷理、室原豊明: "医学のあゆみ"医歯薬出版株式会社. (2000)

1999 年度 実績報告書

ヒト臍帯血からの内皮前駆細胞単離および分化誘導と血管新生療法への応用

研究代表者

室原 豊明 久留米大学, 循環器病研究所, 講師 (90299503)

研究成果

[文献書誌] Rivard A,Murohara T et al.: "Age-dependent impairment of angiogenesis."Circulation. 99. 111-120 (1999)

[文献書誌] Eguchi H,Ikeda H,Murohara T,et al.: "Endothelial injuries of coronary arteries distal to thrombotic sites: Role of adhesive interaciton between endothlial P-selectin and leukocyte sialyl Lewis^X."Circ.Res.. 84. 525-535 (1999)

[文献書誌] Ikeda H,Ueyama T,Murohara T,et al.: "Adhesive interaction between P-selectin and sialyl lewisX plays an important role in recurrent coronary arterial thrombosis in dogs."Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.. 19. 1083-1090 (1999)

[文献書誌] Murohara T,et al.: "Role of endothelial nitric oxide synthase in endothelial cell migration."Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.. 19. 1156-1161 (1999)

[文献書誌] Murohara T,et al.: "Effects of atrial and brain natriuretic peptides on lysophosphatidylcholine-mediated endothelial dysfunction."J.Cardiovasc.Pharmacol.. 34. 870-878 (1999)

[文献書誌] Murohara,T.,et al.: "Rescue of hypercholesterolemia-indused impairment of angiogenesis by dietary L-arginine."Circulation. 100. I-319 (1999)

[文献書誌] 室原豊明、池田久雄、今泉 勉: "医学のあゆみ"医歯薬出版株式会社. (1999)

[文献書誌] 新谷 理、室原豊明: "医学のあゆみ"医歯薬出版株式会社. (2000)

1999 年度実績報告書

室原豊明久留米大学, 循環器病研究所, 講師 (90299503)

[文献書誌] 室原豊明、池田久雄、今泉勉: "医学のあゆみ"医歯薬出版株式会社. (1999)

[文献書誌] 新谷理、室原豊明: "医学のあゆみ"医歯薬出版株式会社. (2000)