2001 年度実績報告書

遺伝子治療における外来遺伝子産物に対する免疫寛容誘導法の開発

研究課題

研究課題/領域番号	11557066
研究機関	慶應義塾大学
研究代表者	天谷雅行慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (90212563)
研究分担者	小安重夫慶應義塾大学, 医学部, 教授 (90153684) 大山学慶應義塾大学, 医学部, 助手 (10255424) 西川武二慶應義塾大学, 医学部, 教授 (50051579)
キーワード	遺伝子治療 / 遺伝性皮膚疾患 / 免疫寛容 / 自己免疫 / モデルマウス / ノックアウトマウス / 皮膚移植 / CD40リガンド
研究概要	現在有効な治療が望めない各種遺伝性疾患に対する遺伝子導入による治療法が近年注目を浴びている。その臨床応用には数多くの課題がのこされている。その一つとして外来遺伝子産物に対する免疫応答の問題がある。本来、特に劣性の罹患患者に欠損遺伝子産物を導入する場合、そのタンパクに対する免疫寛容が確立していないため、こうした免疫反応は不可避のものと考えられる。そこで、本研究は、遺伝子治療により発現させた蛋白に対する効率の良い免疫寛容誘導法を開発することを目的とした。デスモゾーム構成蛋白であるデスモグレイン3のノックアウト(Dsg3-/-)マウスを皮膚遺伝病のモデルとして用いて、Dsg3の遺伝子治療を試み、その際に認められるDsg3に対する免疫応答を検討した。今までの検討でNaked DNA Injection法によりDsg3発現ベクターを表皮に導入したところ、Dsg3に対する抗体産生が認められることが、ELISA法により確認されている。本年度の検討で、この抗Dsg3抗体が遺伝子導入で発現させたDsg3分子に結合することが明らかとなった。しかし、naked DNA injectionは遺伝子導入が安定していないため、こうした免疫応答を確実に評価することは困難であった。そこで今年度はこの免疫応答を抑制する方法を検討するためのモデルとしてDsg3を発現している(Dsg3+/+)マウス皮膚をDsg3-/-マウスに移植する系を確立し、各種検討を試みた。植皮を受けたマウスは、通常、2週間程度で抗Dsg3抗体を産生する。しかし、昨年度までの検討でその有用性が確認された抗CD40リガント抗体で処置したところ、抗Dsg3抗体産生が有意に抑制され、この方法が遺伝子治療における外来遺伝子産物に対する免疫応答の抑制に有用であることが示唆された。

研究成果
(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Sekiguchi M, Futei Y, Fujii Y, Iwasaki T, Nishikawa T, Amagai M: "Dominant autoimmune epitopes recognized by pemphigus antibodies map to the N-terminal adhesive region of desmogleins"J Immunol. 167. 5439-5448 (2001)
[文献書誌] Tsunoda K, Ota T, Suzuki H, Ohyama M, Nagai T, Nishikawa T, Amagai M. Koyasu S: "Pathogenic autoantibody production requires loss of tolerance against desmoglein 3 in both T and B cells in experimental pemphigus vulgaris"Eur J Immunol. 32. 627-633 (2002)
[文献書誌] Amagai M, Yamaguchi T, Hanakawa Y, Nishifuji K, Sugai M, Stanley JR: "Staphylococcal Exfoliative Toxin B Specifically Cleaves Desmoglein 1"J Invest Dermatol. (in press).
[文献書誌] Ohyama M, Amagai M, Tsunoda K, Ota T, Koyasu S, Umezawa A, Hata J, Nishikawa T: "Immunologic and histopathologic characterization of active disease mouse model for pemphigus vulgaris"J Invest Dermatol. 118. 199-204 (2002)
[文献書誌] Ohteki T., Suzue K., Maki C., Ota T., Koyasu S.: "Critical role of IL-15-IL-15R for antigen-presenting cell functions of in the innate immune response"Nat.Immunol.. 2. 1138-1143 (2001)
[文献書誌] 天谷雅行: "免疫2002"自己抗原ノックアウトマウスを用いた新たな自己免疫疾患モデル動物. 265 (2001)

2001 年度 実績報告書

遺伝子治療における外来遺伝子産物に対する免疫寛容誘導法の開発

研究代表者

天谷 雅行 慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (90212563)

研究成果

[文献書誌] Sekiguchi M, Futei Y, Fujii Y, Iwasaki T, Nishikawa T, Amagai M: "Dominant autoimmune epitopes recognized by pemphigus antibodies map to the N-terminal adhesive region of desmogleins"J Immunol. 167. 5439-5448 (2001)

[文献書誌] Tsunoda K, Ota T, Suzuki H, Ohyama M, Nagai T, Nishikawa T, Amagai M. Koyasu S: "Pathogenic autoantibody production requires loss of tolerance against desmoglein 3 in both T and B cells in experimental pemphigus vulgaris"Eur J Immunol. 32. 627-633 (2002)

[文献書誌] Amagai M, Yamaguchi T, Hanakawa Y, Nishifuji K, Sugai M, Stanley JR: "Staphylococcal Exfoliative Toxin B Specifically Cleaves Desmoglein 1"J Invest Dermatol. (in press).

[文献書誌] Ohyama M, Amagai M, Tsunoda K, Ota T, Koyasu S, Umezawa A, Hata J, Nishikawa T: "Immunologic and histopathologic characterization of active disease mouse model for pemphigus vulgaris"J Invest Dermatol. 118. 199-204 (2002)

[文献書誌] Ohteki T., Suzue K., Maki C., Ota T., Koyasu S.: "Critical role of IL-15-IL-15R for antigen-presenting cell functions of in the innate immune response"Nat.Immunol.. 2. 1138-1143 (2001)

[文献書誌] 天谷雅行: "免疫2002"自己抗原ノックアウトマウスを用いた新たな自己免疫疾患モデル動物. 265 (2001)

2001 年度実績報告書

天谷雅行慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (90212563)