| 研究概要 |
本年度は,生体分子間相互作用解析システムBIAcoreを用いて,精製P.gingivalis線毛の様々な宿主由来タンパク質との結合反応を解析した.その結果,線毛は3種の唾液タンパク質(高プロリン含有タンパク質および糖タンパク質,スタセリン),フィブリノーゲン,ヘモグロビンと代表的な細胞外マトリックスタンパクであるビトロネクチン,ラミニン,トロンボスポンジン,I&IV型コラーゲン,フィブロネクチン,エラスチンに対して特異的結合能を有していることが明らかとなった.さらに細胞間接着因子であるヒトインテグリンファミリー分子への線毛の結合親和性を評価するために,インテグリンαVおよびβ3のcDNAをそれぞれpcDNA3,pcDNA3.1プラスミドに組み込んだベクターをCHO細胞へ導入し,インテグリンαVβ3高発現細胞株を樹立した.線毛は高発現されたインテグリンαVβ3に対しても有意な結合親和性を示し,さらにビトロネクチンとインテグリンとの相互作用が線毛添加により顕著に阻害された.これらの結果から,線毛はP.gingivalisの宿主への付着・定着に重要な役割を果たしているばかりではなく,歯周組織の修復を阻害する働きを有していることが示唆された.
線毛と宿主タンパクとの結合に際し,高プロリン含有タンパク質由来の21残基よりなる合成ペプチドPRP-Cが顕著な結合阻害効果を示した.また,食用天然抽出物であるプロタミンも同様の阻害能を有していたばかりではなく,2μg/mlの濃度でヒト線維芽細胞のDNA合成を3倍にまで促進し,顕著なマイトージェン活性を示した.次年度も引き続きこれらペプチドの線毛に対する結合阻害作用や歯肉線維芽細胞への影響の解析を行う予定である.
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