| 研究課題/領域番号 |
11557195
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 展開研究 |
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| 研究分野 |
医薬分子機能学
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| 研究機関 | 岐阜薬科大学 |
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研究代表者 |
原 明 岐阜薬科大学, 薬学部, 教授 (00094334)
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| 研究分担者 |
石倉 周平 岐阜薬科大学, 薬学部, 助手
宇佐見 則行 岐阜薬科大学, 薬学部, 助手 (60257483)
出屋敷 嘉宏 岐阜薬科大学, 薬学部, 講師 (00202193)
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| 研究期間 (年度) |
1999 – 2001
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| キーワード | ヒドロキシステロイド脱水素酵素 / 神経ステロイド / 遺伝的多型性 / 構造機能相関 / 阻害剤 / 活性化剤 / 遺伝子発現調節 / 遺伝子導入 |
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| 研究概要 |
3α-および20α-ヒドロキシステロイド脱水素酵素(3αHSDと20αHSD)は、動物脳では神経ステロイドや男性ホルモンの生成・代謝に関与するとされている.ヒトでは、1種の20αHSDと3種の3αHSD(1-3型)が存在し、神経ステロイド代謝における意義は不明であるが、臨床的には神経ステロイドがいくつかの神経疾患に関係すると示唆されている。木研究では、ヒトの両酵素を標的にして神経疾患の医薬品の開発を最終目標として、次の6点について研究を行った。
(1)神経ステロイド代謝における両酵素の役割。ヒト脳では20αHSD体は神経ステロイドおよび前駆体のプロゲステロンの不活性化に、3αHSD3型が神経ステロイドの生合成に重要であることを明らかにした。
(2)阻害剤と活性化剤の探索。3αHSD1型のみがいくつかの薬剤とチロキシンで活性化された。各酵素の特異的な阻害剤を見出したが、このうち20αHSDを特異的かつ強く阻害するペンズプロマロンとその類縁体は神経機能調節薬や妊娠維持薬の開発のリード化合物となりえることが示唆された。
(3)酵素の構造と機能の相関。部位特異的変異法により、20αHSDと3αHSD1型の機能アミノ酸および活性化剤と阻害剤の結合に関与する残基または領域を明らかにした。20αHSDの結晶構造解析は進行中である。
(4)遺伝子発現の調節。エタクリン酸が多くの細胞で、3αHSD1型を除く酵素を誘導した。3αHSD1型の肝特異的発現に関係する転写因子を同定した。
(5)遺伝的多型性。発現mRNAおよぴ染色体DNA分析により3α:HSD1型の変異遺伝子を同定し、その変異による酵素活性への影響を明らかにした。
(6)酵素や遺伝子を導入した培養細胞および動物における候補薬物の評価系の確立・細胞を用いた評価系はできたが、遺伝子の動物への導入では脳機能に影響が出るほどの各酵棄の高発現動物を作製できなかった。動物モデルの作製は今後検討する予定である。
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