1999 年度実績報告書

外因性内分泌かく乱物質による輸送・代謝を中心とする生体防御系(解毒機構)への影響

研究課題

研究課題/領域番号	11557200
研究種目	基盤研究(B)
研究機関	広島大学
研究代表者	村上照夫広島大学, 医学部, 助教授 (20136055)
研究分担者	永井純也広島大学, 医学部, 助手 (20301301) 高野幹久広島大学, 医学部, 教授 (20211336)
キーワード	内分泌かく乱物質 / P-糖蛋白質 / チトクロームP4503A / 生体防御 / di-2-ethylhexyl phthalate / 誘導
研究概要	ATP依存的な薬物排出ポンプ、P-糖蛋白質(P-gp)は,種々の薬物代謝酵素と共に、生体の防御・解毒機構を形成している。本研究ではこれらの生体防御系(P-gp機能・チトクロームP450(CYP)3A代謝系)に及ぼす種々内分泌かく乱物質の影響について検討を進めており、本年度は(1)In vivo評価システムの構築,(2)ヒト尿中に検出されたdi-2-ethylhexyl phthalate(DEHP)のP-gpへの影響について検討し、以下の知見を得た。 (1)In vivo評価システムの構築:ラットにおけるrhodamine123(Rho123)のP-gp介在性胆汁・尿細管分泌クリアランス等の変動により、内分泌かく乱物質の影響を定量的に評価しうることが認められた。しかし、ラットのCYP3A活性は5-6,8-9週齢メス<5-6週齢オス<8-9週齢オス、一方、P-gp活性は8-9週齢オス<5-6週齢オス<5-6週齢メス<8-9週齢メスの順となるなど、CYP3A/P-gp活性に顕著な性・週齢差が認められた。内分泌かく乱物質の影響を感度よく検出するに当たり、性・週齢等が重要な因子になると考えられ、in vivo評価システムの構築にはさらに若干の検討を要する。 (2)DEHPのP-gpへの影響:プラスチック可塑剤であるDEHPは、大気や水道水などにも通常検出され、外因性内分泌かく乱物質として知られている。本年度の検討により、DEHPはヒト尿中にも検出されることがGC-MS-SIM等による構造解析により明らかとなった。P-gp機能に及ぼすDEHP共存、あるいは長時間処置の影響をCaco-2及びLLC-GA5-COL150細胞で評価したところ、DEHP自身はP-gpの基質とはならないものの、膜流動性の変化を引き起こすことによりP-gp基質の細胞内蓄積を増大すること、および2日間のDEHP処置によりP-gpを誘導することが示された。

研究成果
(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Ryoko Yumoto: "Transport of rhodamine 123, a P-glycoprotein substrate, across rat intestine and Caco-2 cell monolayers in the presence of cytochrome P-450 3A-related compounds."J. Pharm. Exp. Ther.. 289・1. 149-155 (1999)
[文献書誌] Fumiko Higashikawa: "Dose-dependent intestinal ans hepatic first-pass metabolism of midazolam, a cytochrome P450 3A substrate with differently modified enzyme activities in rats."J. Pharm. Pharmacol.. 51・1. 67-72 (1999)
[文献書誌] Tetsu Kajikawa: "Role of P-glycoprotein distribution of Rhodamine 123 into aqueous humor in rabbits"Current Eye Res.. 18・3. 240-246 (1999)
[文献書誌] Fumiko Higashikawa: "In-vivo and in-vitro metabolic clearance of midazolam, a cytochrome P450 3A substrate, by the liver under normal and increased enzyme activity in rats."J. Pharm. Pharmacol.. 51・4. 405-410 (1999)
[文献書誌] Fumiko Higashikawa: "Hepatic Metabolic clearance of midazolam, a cytochrome P450 3A substrate, in the presence of ketoconazole in rats."Pharm. Pharmacol. Commun.. 5. 529-536 (1999)
[文献書誌] Tetsu Kajikawa: "P-Glycoprotein-mediated ocular clearance of rhodamine 123, a P-glycoprotein substrate, in rabbits."Pharm Res.. 17・4. (2000)

1999 年度 実績報告書

外因性内分泌かく乱物質による輸送・代謝を中心とする生体防御系(解毒機構)への影響

研究代表者

村上 照夫 広島大学, 医学部, 助教授 (20136055)

研究成果

[文献書誌] Ryoko Yumoto: "Transport of rhodamine 123, a P-glycoprotein substrate, across rat intestine and Caco-2 cell monolayers in the presence of cytochrome P-450 3A-related compounds."J. Pharm. Exp. Ther.. 289・1. 149-155 (1999)

[文献書誌] Fumiko Higashikawa: "Dose-dependent intestinal ans hepatic first-pass metabolism of midazolam, a cytochrome P450 3A substrate with differently modified enzyme activities in rats."J. Pharm. Pharmacol.. 51・1. 67-72 (1999)

[文献書誌] Tetsu Kajikawa: "Role of P-glycoprotein distribution of Rhodamine 123 into aqueous humor in rabbits"Current Eye Res.. 18・3. 240-246 (1999)

[文献書誌] Fumiko Higashikawa: "In-vivo and in-vitro metabolic clearance of midazolam, a cytochrome P450 3A substrate, by the liver under normal and increased enzyme activity in rats."J. Pharm. Pharmacol.. 51・4. 405-410 (1999)

[文献書誌] Fumiko Higashikawa: "Hepatic Metabolic clearance of midazolam, a cytochrome P450 3A substrate, in the presence of ketoconazole in rats."Pharm. Pharmacol. Commun.. 5. 529-536 (1999)

[文献書誌] Tetsu Kajikawa: "P-Glycoprotein-mediated ocular clearance of rhodamine 123, a P-glycoprotein substrate, in rabbits."Pharm Res.. 17・4. (2000)

1999 年度実績報告書

村上照夫広島大学, 医学部, 助教授 (20136055)