研究課題
(1)cDNA発現ライブラリーのスクリーニングによる方法昨年度より継続しているcDNA発現ライブラリーのスクリーニングによるES細胞の分化抑制/増殖刺激因子KSRSの単離の試みは、現在も遺伝子同定には至っていない。今後、ライブラリーサイズの拡大が必要と考えられ、現在その準備を進めている。(2)既知のサイトカイン/増殖因子の効果の検討既知のサイトカイン/増殖因子の検討において、growth differentiation factor(GDF)-3が未分化ES細胞特異的に発現していることを見い出した。その組み換えタンパクの精製が困難なために、機能解析は未だ完了していないが、現在精製方法の検討を進めている。しかし、その細胞内シグナル伝達に関与すると考えられるSmadの活性化を抑制Smadの強制発現によって阻止すると、ES細胞の増殖が抑えられ、逆にアンチセンス法で抑制Smadの発現を抑えるとES細胞の増殖が亢進することから、現在これがKSRSの有力な候補であると考えている。(3)血清からのKSRSの精製血清中にもKSRS活性が認められることから、ここからの精製も進めており、陰イオン交換等の分画で濃縮が可能であることが確認された。現在、大量精製の為のプロトコールを確立するために、詳細な条件検討を進めており、近日中にその作業に着手出来る予定である。
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