1999 年度実績報告書

ヒト肝臓幹細胞分離法の確立とその分化能を利用した人工肝臓構築のための組織再生工学

研究課題

研究課題/領域番号	11558101
研究種目	基盤研究(B)
研究機関	秋田大学
研究代表者	杉山俊博秋田大学, 医学部, 教授 (00127242)
研究分担者	澤井博秋田住友ベーク株式会社, 研究員寺田邦彦秋田大学, 医学部, 助教授 (60197796)
キーワード	肝細胞 / 胆管上皮細胞 / 組織再生工学 / 人工肝臓構築 / 肝臓幹様細胞 / 肝特異的転写因子 / HNF-1
研究概要	われわれは、これまでにウィルソン病のモデル動物であるLECラットの肝臓からoval cellと思われる細胞を分離して、in vivoで肝細胞へと分化したことを報告した。今回は、正常ラット肝臓の非実質細胞群の中から、oval cellに類似した培養可能な細胞を分離して、その特徴について検討した。正常なラット肝臓の非実質細胞に由来する幹様細胞株が樹立できた。この細胞は未熟な肝細胞と胆管上皮細胞の両方の性質を有していた。この細胞をコラーゲンゲルを用いて3次元的に培養すると、albuminを発現するようになり、肝細胞系へと分化したと思われた。次に、肝特異的転写因子をトランスフェクションしてアルブミンを発現することが出来るかどうか、in vitro系で検討した。その結果、肝特異的転写因子をトランスフェクションした肝臓幹様細胞は、コラーゲンの2次元培養系ではアルブミンを合成できるようになるが、ここにレチノイン酸やEGFを添加するとアルブミン合成は抑制された。以上の結果、肝特異的転写因子(HNF-1)をトランスフェクションした肝臓幹様細胞SD-SLC/HNF-1は、コラーゲンの2次元培養系ではアルブミンを合成できるようになるが、ここにレチノイン酸やEGFを添加するとアルブミン合成は抑制された。このことは、これらの因子は肝臓幹様細胞を脱分化する働きがあると考えられた。本研究で肝臓幹細胞の分離と分化誘導は確立したと思われる。

研究成果
(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] Nagai H.et al.: "Genomic DNA analyses of spontaneous hepatocellular carcinomas in LEC rat liver using a new technique"Oncology Report. 7. 315-318 (2000)
[文献書誌] Komatsu M.et al.: "Cisplatin resistance conferred by copper transporting P-type ATPase cDNA (ATP7B)"Cancer Res.. (in press). (2000)
[文献書誌] Harada M.et al.: "Wilson's disease gene product,ATP7B localizes in the late endosomes in a human hepatoma cell line and normal rat hepatocytes : Participation in biliary copper"Gastroenterology. (in press). (2000)
[文献書誌] Terada K.et al.: "Biliary expression of copper in LEC rat after introduction of copper transporting P-type ATPase,ATP7B"FEBS Lett.. 448. 53-56 (1999)
[文献書誌] Terada K.et al.: "The Long-Evans Cinnamon rat : An animal model for Wilson's disease"Pediatr.Int.. 41. 414-418 (1999)
[文献書誌] Watanabe I.et al.: "Detection of apoptotic cells in human colorectal cancer by in situ methods : Antibody against single-stranded DNA and terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end-labeling (TUNEL) methods"Jpn.J.Cancer Res.. 90. 188-193 (1999)
[文献書誌] Sugiyama,T. et al.: "Liver stem-like (oval) cells : isolation,differentiation and application for cell therapy,In Ikada,Y.and Okano,T.ed.Tissue Engineering for Therapeutic Use"Elsevier Science B.V.. 161 (1999)

1999 年度 実績報告書

ヒト肝臓幹細胞分離法の確立とその分化能を利用した人工肝臓構築のための組織再生工学

研究代表者

杉山 俊博 秋田大学, 医学部, 教授 (00127242)

研究成果

[文献書誌] Nagai H.et al.: "Genomic DNA analyses of spontaneous hepatocellular carcinomas in LEC rat liver using a new technique"Oncology Report. 7. 315-318 (2000)

[文献書誌] Komatsu M.et al.: "Cisplatin resistance conferred by copper transporting P-type ATPase cDNA (ATP7B)"Cancer Res.. (in press). (2000)

[文献書誌] Harada M.et al.: "Wilson's disease gene product,ATP7B localizes in the late endosomes in a human hepatoma cell line and normal rat hepatocytes : Participation in biliary copper"Gastroenterology. (in press). (2000)

[文献書誌] Terada K.et al.: "Biliary expression of copper in LEC rat after introduction of copper transporting P-type ATPase,ATP7B"FEBS Lett.. 448. 53-56 (1999)

[文献書誌] Terada K.et al.: "The Long-Evans Cinnamon rat : An animal model for Wilson's disease"Pediatr.Int.. 41. 414-418 (1999)

[文献書誌] Watanabe I.et al.: "Detection of apoptotic cells in human colorectal cancer by in situ methods : Antibody against single-stranded DNA and terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end-labeling (TUNEL) methods"Jpn.J.Cancer Res.. 90. 188-193 (1999)

[文献書誌] Sugiyama,T. et al.: "Liver stem-like (oval) cells : isolation,differentiation and application for cell therapy,In Ikada,Y.and Okano,T.ed.Tissue Engineering for Therapeutic Use"Elsevier Science B.V.. 161 (1999)

1999 年度実績報告書

杉山俊博秋田大学, 医学部, 教授 (00127242)