| 研究概要 |
われわれは、平成11年度に、ラットから単離した肝臓星細胞と肝実質細胞を性質の異なる細胞外マトリックス上つまりポリスチレン培費皿上、I型コラーゲンゲル上、I型コラーゲンゲル内、およびマトリゲル上に、組織形成を促進する活性持続型ビタミンC存在下で共培養すると、I型コラーゲンゲル内培養で形成された肝組繊が他のマトリックスで培養したものに比較して、もっとも良く生体内肝細胞索構造に類似した三次元肝組織を形成し、かつ毛細胆管様構造とディッセ腔様の構造が形成することを明らかにした。つまり「細胞外マトリックスの成分およびその三次元構造が組織形成を制御する」ことを明らかにした。またこの培養肝組織では、肝実質細胞間に細胞間接着装置復合体(tight junction, adherens junction,desmosome)およびgap junctionが形成されることも明らかにした。しかし肝組織形成における、星細胞間接着装置の形成は不明であった。そこで平成12年度では、星細胞を性質の異なる細胞外マトリックス上に単独培養し、その微細構造を透過型電子顕微鏡で詳しく解析した。その結果、培養星細胞問に接着装置が形成されることを明らかにした。この接着はその微細形態の特徴よりadherens junctionである可能性が示された。そこで本年度(平成13年度)では、この培養星細胞間に形成されるこの接着装置の性質を明らかにする目的で、星細胞をI型コラーゲンゲル上に培養しadherens junction構成要素であるカドヘリンおよびカテニンについてその局在を、共焦点レーザー顕微鏡をもちいた免疫蛍光染色法により解析した。その結果、pan-cadherin抗体とα-およぴβ-catenin抗体それぞれに対する免疫蛍光が培養星細胞間の接触部に局在した。つまりcadherinとα-およびβ-cateninが星細胞間接着に関与すること、いいかえると肝臓星細胞間に形成される接着構造がadherens junctionであることを分子レベルで明らかにした。これらデーターより組織形成において細胞外マトリックスが細胞間接着装置形成を介して組織形成を制御することが示唆された。また本研究により哺乳動物の星細胞間における接着装置形成が微細構造および分子レベルではじめて明らかにされた。
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