| 研究概要 |
血管収縮ペプチドであるエンドセリン(ET)により活性化されるCa^<2+>チャンネルの構造と機能を解析した。まず,パッチクランプ法を用いて,血管平滑筋においてETにより活性化されるCa^<2+>チャンネルを解析し,3種類のチャンネルが関与することと,これらのチャンネルに選択的な遮断薬を発見した。次いで,これら3種類のチャンネルのcDNAクローニングを2とおりの方法を用いて試みた。一つはPCRクローニングであり,もう一つはアフリカツメガエル卵母細胞を用いた発現クローニングである。PCRの場合には,これまでに発表されているtrpというCa^<2+>チャンネルの共通部分をプローブとして用い,また,発現クローニングの場合には通常の2電極ボルテージクランプ法ではなく^<45>Ca^<2+>の取り込みをスクリーニング法として開発した。その結果,これまでに報告されているtrp4というCa^<2+>チャンネル(通常,6回膜貫通構造を有する)の他に,trp4のスプライス変異型と考えられる平滑筋に特異的なチャンネルを得た。後者は第1,2番目の膜貫通領域を欠損していた。これら2つのチャンネルを卵母細胞あるいはHEK293細胞に発現させて,その電気生理学的特徴を明らかにした。残りの2種類のチャンネルについては現在精力的に研究を進めている。
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