1999 年度実績報告書

LIMドメイン蛋白及びLdb2の肺発生分化・肺癌発症への関与の解析

研究課題

研究課題/領域番号	11670158
研究機関	愛知県がんセンター
研究代表者	長田啓隆愛知県がんセンター, 病態学研究室, 室長 (30204176)
キーワード	肺癌 / LIMドメイン
研究概要	我々はLIMドメインとキナーゼドメインを持つLIMK2遺伝子を単離し、このLIMK2にはN末側の異なる2a・2bの2種のisoformが存在し、各々のisoformの発現が組織特異的に制御され、癌細胞において発現制御異常が見られることを報告した。本年度は、このLIMK2 isoformの組織特異的な発現制御機構の解明を目指して、2種のisoform各々のプロモーター領域を単離し解析を進めた。転写制御部位を同定するため、各プロモーターの種々の領域を持つレポーターを作成し、レポーター解析を施行した。その結果両プロモーターに複数の転写活性化部位・転写抑制部位を認めた。LIMK2bの転写活性化領域には、一部の脳細胞の発生分化に必須と報告される核内レセプターRORαの結合部位が見られ、LIMK2b高発現細胞株においてRORαの発現が亢進していた。更に、RORα発現ベクターをLIMK2bレポーターと同時導入したところ、転写促進作用が認められ、RORαが実際にLIMK2遺伝子のisoformの発現制御に関与していることが示唆された。この転写促進はレチノイン酸存在下でのみ認められ、RORαはレチノイン酸受容体と共同して作用する可能性も示唆された。一方、LIMK2aの転写活性化領域とLIMK2bの転写抑制領域に細胞分化に関与するMZF1の結合部位が見られた。更に、MZF1を各レポーターと同時導入し解析したところ、LIMK2aレポーターに対し軽度ながら転写活性化作用を示し、MZF1もLIMK2 isoformの発現制御に関与することが示唆された。今後さらに、LIMK2遺伝子及び我々が単離したLIMドメインに結合し機能制御するヒトLdb2遺伝子の細胞生物学的作用を、Tet-Off発現系でLIMK2a・2bを発現誘導できる正常肺上皮細胞株等を用い検討していく予定である。

研究成果
(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Nomoto S., Tatematsu Y. et al.: "Cloning and characterization of the alternative promoter regions of the human LIMK2 gene responsible for alternative transcripts with tissue-specific expression"Gene. 236・2. 259-271 (1999)
[文献書誌] Takahashi T., Haruki N., et al.: "Identification of frequent impairment of the mitotic checkpoint genes, hsMAD2 and p55CDC, in human lung cancers"Oncogene. 18・30. 4295-4230 (1999)
[文献書誌] Nomoto S., Haruki N., et al.: "Search for in vivo somatic mutations in the mitotic checkpoint gene, hMAD1, in human lung cancers"Oncogene. 18・50. 7180-7183 (1999)
[文献書誌] Yanagisawa K., Uchida K., et al.: "Heterogeneities in the biological and biochemical functions of Smad2 and Smad4 mutants naturally occurring in human lung cancers"Oncogene. (印刷中). (2000)
[文献書誌] Haruki N., Yatabe Y., et al.: "Homo- and heterogeneity within high-grade neuroendocrine tumors of the lung"Jpn. J. Cancer Res.. (印刷中). (2000)
[文献書誌] Haruki N., Saito H., et al.: "Molecular Analysis of the Mitotic Checkpoint Genes BUB1, BUBR1 and BUB3 in Human"Cancer Letters. (印刷中). (2000)

1999 年度 実績報告書

LIMドメイン蛋白及びLdb2の肺発生分化・肺癌発症への関与の解析

研究代表者

長田 啓隆 愛知県がんセンター, 病態学研究室, 室長 (30204176)

研究成果

[文献書誌] Nomoto S., Tatematsu Y. et al.: "Cloning and characterization of the alternative promoter regions of the human LIMK2 gene responsible for alternative transcripts with tissue-specific expression"Gene. 236・2. 259-271 (1999)

[文献書誌] Takahashi T., Haruki N., et al.: "Identification of frequent impairment of the mitotic checkpoint genes, hsMAD2 and p55CDC, in human lung cancers"Oncogene. 18・30. 4295-4230 (1999)

[文献書誌] Nomoto S., Haruki N., et al.: "Search for in vivo somatic mutations in the mitotic checkpoint gene, hMAD1, in human lung cancers"Oncogene. 18・50. 7180-7183 (1999)

[文献書誌] Yanagisawa K., Uchida K., et al.: "Heterogeneities in the biological and biochemical functions of Smad2 and Smad4 mutants naturally occurring in human lung cancers"Oncogene. (印刷中). (2000)

[文献書誌] Haruki N., Yatabe Y., et al.: "Homo- and heterogeneity within high-grade neuroendocrine tumors of the lung"Jpn. J. Cancer Res.. (印刷中). (2000)

[文献書誌] Haruki N., Saito H., et al.: "Molecular Analysis of the Mitotic Checkpoint Genes BUB1, BUBR1 and BUB3 in Human"Cancer Letters. (印刷中). (2000)

1999 年度実績報告書

長田啓隆愛知県がんセンター, 病態学研究室, 室長 (30204176)