自己免疫性糸球体腎炎の発症・進展機構におけるオステオポンチン遺伝子多型の役割

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11670217
• 研究機関: 愛媛大学
• 研究代表者: 宮崎 龍彦 愛媛大学, 医学部, 助手 (80239384)
• 研究分担者: 能勢 眞人 愛媛大学, 医学部, 教授 (70030913)
• キーワード: オステオポンチン / 遺伝子多型 / 糸球体腎炎 / MRL / lprマウス / 合成多型蛋白 / 機能解析 / IgG3 / サイトカイン

研究概要

1)オステオポンチン(OPN)遺伝子型と糸球体腎炎発症のリンケージ解析
種々の膠原病疾患を自然発症するMRL/lprと、C3H/lprのもどし交配系(N2)179匹、兄妹交配系(F2)530匹を作成し、実験に供した。これらマウスのループス様腎炎の組織病理学的変化をスコアリングし、このスコアとマイクロサテライトマーカーを用いたsimple sequence length polymorphismによる遺伝子型のリンケージ解析を行ったところ、F2マウスにおいて、OPN遺伝子型と糸球体腎炎の発症・進展の間に有意な関連(P=0.00079)を認めた。5番染色体のリンケージ解析の結果、OPN遺伝子座が糸球体腎炎の発症・進展との間にもっとも高い関連を示した。
2)OPN遺伝子型と血清IgG3発現量の関連解析
上記マウスの血清IgG3をELISAを用いて測定し、(MRL/lpr x C3H/lpr)F2マウスにおいてOPN遺伝子型の異なる群間で血清IgG3量に有意差を認めた。
3)OPNリコンビナント蛋白のin vitroにおける機能解析
MRL/lpr、C3H/lpr各々の脾細胞cDNAライブラリーを作成し、オステオポンチンcDNAをサブクローニングした。これをSp6発現ベクターに組込み、コムギ胚芽を用いた無細胞系蛋白合成システムによりMRL型、C3H型それぞれの合成多型蛋白を作成した。これをMRL/+またはC3H/+マウス由来の脾細胞の培養系に加え、サイトカインおよびIgGの発現量を定量したところ、少なくともIgGの産生およびサイトカイン発現量に有意差を認めた。
OPN構造遺伝子多型が抗体産生の亢進を介してMRL/lprにおける糸球体腎炎の発症・進展に関与していることが示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Nakatsuru S,Terada M,Nishihara M,Kamogawa J,Miyazaki T,Qu WM,Mori S,Nose M et.al.: "Genetic dissection of the complex pathological manifestataions of collagen disease in MRL/lpr mice."Pathology International. 49・11. 974-982 (1999)
• [文献書誌] Nishihara M,Terada M,Kamogawa J,Ohashi Y,Mori S,Nakaturu S,Nakamura Y,Nose M,: "Genetic basis of autoimmune sialoadenitis in MRL/lpr lupus mice:additive and hierarchical properties on polygenic inheritance."Arthritis & Rheumatism. 42・12. 2616-2623 (1999)
• [文献書誌] Nishimura H,Nose M,Hiai H,Minato N and Honjo T.: "Development of Lupus-like Autoimmune Diseases by Disruption of the PD-1 Gene Encoding an ITIM Motif-Carrying Immunoreceptor."Immunity. 11・2. 141-151 (1999)
• [文献書誌] Ito MR,Terasaki S,Kondo E,Shiwaku H,Fukuoka Y,Nose M.: "Experimental lupus nephritis in severe combined immunodeficient(SCID)mice:remodelling of the glomerular lesions by bystander IgM antibodies."Clin Exp Immunol. 119・2. 340-345 (2000)
• [文献書誌] Nose M,Terada M,Nishihara M,Kamogawa J,Miyazaki T,Qu W-M,Mori S,Nakatsuru S.: "Genome analysis of collagen disease in MRL/lpr mice:polygenic inheritance resulting in the complex pathological manifestations."Int J Cardiol. (in press).
• [文献書誌] Nose M,Nishihara M,Kamogawa J,Terada M,Nakatsuru S.: "Genetic basis of autoimmune disease in MRL/lpr mice:Dissection of the complex pathological manifestations and their susceptibility loci.."Rev Immunogenet. (in press).
• [文献書誌] Nose M,Nishihara M,Fujii H.: "Lessons from MRL/lpr and related mouse models:Genetic basis of the complex pathological manifestations of the collagen disease."Int Rev Immunol(in press).
• [文献書誌] 伊藤美津子,小野寺健,阿部弘之,三浦正悦,能勢真人: "バルサルバ洞動脈瘤破裂に伴う大動脈弁断列にて急死した大動脈炎の一剖検例"リウマチ. 39・6. 853-859 (2000)
• [文献書誌] 能勢眞人: "血管炎の遺伝要因-モデルマウスのゲノム解析-"治療学. 33・2. 152-156 (1999)
• [文献書誌] 能勢眞人: "血管炎モデルマウスのゲノム解析"Bio Clinica. 14・3. 320-322 (1999)
• [文献書誌] 能勢眞人: "自然発症疾患モデル動物:血管炎"Morecular Medicine. 34・1. 32-36 (1999)