リボザイムによる肺癌の進展に関わる血管内皮増殖因子アイソフォームの機能解析

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11670227
• 研究機関: 東海大学
• 研究代表者: 中村 雅登 東海大学, 医学部, 助教授 (00164335)
• 研究分担者: 上山 義人 東海大学, 医学部, 助教授 (30072408)
• キーワード: リボザイム / 血管内皮増殖因子 / 非小細胞性肺癌 / アイソフォーム / 血管新生 / 遺伝子治療

研究概要

細胞関連型isoform VEGF189の発現は固形癌の増殖、遠隔転移、予後に密接に関連することが想定されている。本研究はこの細胞関連型VEGF189アイソフォームの機能を細胞生物学的に証明しようとするものである。細胞関連型VEGF189のexon6によりコードされる特定領域配列を標的にしたリボザイム(RNA酵素)を非小細胞肺癌株に導入し、VEGF189をin vivoで分解し、非小細胞肺癌株におけるVEGF189分子の機能を腫瘍生物学的に考察した。平成12年度は前年度に成功したVEGF189を特異性に切断できるリボザイムををベクターpHβに組み込んだ(pHβ/V189Rz,pHβ/dis-V189Rz)。これをリポフェクションにより遺伝子導入したVEGF189発現の確認されているOZ-6肺癌株に導入した。RT-PCR・シークエンス解析でリボザイムの導入を確認し(OZ-6/VR)、同定されたリボザイム導入細胞株を用い、細胞生物学的解析を行なった。その結果リボザイムによるVEGF189の分解によって、非小細胞肺癌間質の血管新生が抑制され、肺癌の増殖がin vivoで抑制されることを明らかにした。これらの研究成果から細胞関連型VEGF189はより特異的かつ効率的に肺癌の間質血管新生、遠隔転移に関連することが証明された。本研究成果は非小細胞肺癌の新しい治療法の開発につながる独創的かつ重要なものである。研究成果は"Ribozyme approach to downregulate vascular endothelial growth factor(VEGF)189 expression in non-small cell lung cancer(NSCLC)"として論文発表された(Eur.J.Cancer 36:2390-2396,2000)。

研究成果

• [文献書誌] H.Osada,M.Nakamura, et.al.: "Gene expression of angiogenesis related factors in glioma"International Journal of Oncology. 18. 305-306 (2001)
• [文献書誌] Y.Oshika,M.Nakamura, et al.: "Ribozyme approach to downregulate vacular endoethelial growth factor (VEGF) 189 expression in non-small cell lung cancer (NSCLC)"European Journal of Cancer. 36(18). 2390-2396 (2000)
• [文献書誌] T.Tokunaga,M.Nakamura, et.al.: "Ribozyme mediated inactivation of mutant K-ras oncogene in a colon cancer cell line"British Journal of Cancer. 83(6). 833-839 (2000)
• [文献書誌] H.Hatanaka,M.Nakamura, et.al.: "Clinical implications of interleukin (IL)-10 induced by non-small-cell lung cancer"Annals of Oncology. 11. 815-819 (2000)
• [文献書誌] M.Nakamura,Y.Abe, et.al.: "A case of Pulmonary Adenocarcinoma with Overexpression of Multidrug Resistance-Associated Protein and p53 Aberration"Anticancer Research. 20. 1921-1926 (2000)
• [文献書誌] T.Tsuchida,M.Nakamura, et al.: "Adenovirus-mediated anti-K-ras ribozyme induces apoptosis and growth suppression of human pancreatic carcinoma"Cancer Gene Therapy. 7(3). 373-383 (2000)