アロ骨髄移植でのストローマ細胞補充の必要性とその役割の細胞及び分子生物学的解析

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11670229
• 研究機関: 関西医科大学
• 研究代表者: 比舎 弘子 関西医科大学, 医学部, 講師 (90151422)
• 研究分担者: 杉浦 喜久弥 関西医科大学, 医学部, 講師 (30171143) ; 稲葉 宗夫 関西医科大学, 医学部, 助教授 (70115947)
• キーワード: 骨髄移植 / 骨髄ストローマ細胞 / 胸腺ストローマ細胞 / 多能性造血幹細胞 / positive selection / 門脈内投与

研究概要

骨髄ストローマ細胞の骨髄移植(BMT)における重要性をさらに詳しく解析した。
1.アロのBMTの組み合わせの中でも特に[DBA/2(D2)→C57BL/6(B6)]や[B6→MRL/lpr(SLEのモデルマウス)]では、ドナーの骨髄細胞が生着しにくい事(chimerism resistance)が知られている。レシピエントを分割照射(5.5〜6Gy)し、門脈経路でドナー骨髄細胞を移入、さらに5日後に静脈内へ骨髄細胞を追加投与すると、生存率が著しく上昇した。骨髄、脾臓、胸腺等の各臓器でドナー細胞の生着を認めた。門脈経路でのドナー骨髄細胞移入により、まず骨髄ストローマ細胞が肝臓(特に血管周囲)にtrapされて造血コロニーが形成され、次に骨髄、脾臓に造血の場が移行したと考えられる。
2.骨髄ストローマ構成細胞の内のどれが重要か調べるため、ドナーの骨髄ストローマ細胞の代わりに造血支持能を持つ前脂肪細胞株(PA6やMS-5)を造血幹細胞と共に門脈経路でレシピエントに移入した。脾臓での造血コロニー形成は、造血幹細胞単独と比べ増加したが、有意の差はなかった。従って、これら前脂肪細胞株には、成体内での造血支持能がないのかあるいは、他種の細胞の存在も造血支持層の形成に不可欠であると推察された。
3.MHC class I knockout miceおよびH-2congenic mice由来の造血幹細胞と造血支持細胞との共培養実験を行い、両者間に存在するMHC拘束性を検討した。MHC遺伝子のKとD locusが拘束性を規定しているものと考えらえた。

研究成果

• [文献書誌] 杉浦喜久弥,比舎弘子 他: "造血幹細胞とストローマ細胞間のMHC拘束性"臨床免疫. 32・2. 183-189 (2000)
• [文献書誌] Li Y,Hisha H,Inaba M,Lian Z,Yu C,Kawamura M,-Ikehara S: "Evidence for migration of donor bone marrow stromal cells into recipient thymus after bone marrow transplantation plus bone grafts ; a role of stromal cells in positive selection."Exp.Hematol.. 28. 950-960 (2000)
• [文献書誌] Sugiura K,Hisha H,-Ikehara S: "Major histocompatibility complex restriction between hematopoietic stem cells and stromal cells in vitro"Stem Cells. 19. 46-58 (2001)
• [文献書誌] Kushida T,Inaba M,Hisha H,Ichioka N,-Ikehara S: "Intra-bone marrow injection of allogeneic bone marrow cells : A powerful new strategy for treatment of intractable autoimmune diseases in MRL/lpr mice"Blood. (In press).
• [文献書誌] Fan T,Hisha H,-Ikehara S (T.Fan & Hisha H,equal contributors): "Sucessful allogeneic bone marrow transplantation (BMT) by injection of bone marrow cells via portal vein : Stromal cells as BMT-facilitating cells"Stem Cells. (In press).
• [文献書誌] Kushida T,Inaba M,Hisha H,Ichioka N,-Ikehara S: "Crucial role of donor-derived stromal cells in successful treatment for intractable autoimmune diseases in MRL/lpr mice by BMT via portal vein"Stem Cells. (In press).