劇症例A群レンサ球菌感染症に関係する病原因子の解析

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11670261
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 太田 美智男 名古屋大学, 医学部, 教授 (20111841)
• 研究分担者: 山篠 貴史 名古屋大学, 医学部, 助手 (00314005) ; 長谷川 忠男 名古屋大学, 医学部, 助教授 (10314014)
• キーワード: A群レンサ球菌 / TSLS / 2次元電気泳動 / 菌外蛋白質 / Mタイプ / SpeF / 病原因子 / 遺伝子バンク

研究概要

A群レンサ球菌は様々な毒素や酵素を菌体外に分泌する。これらは菌体表層蛋白とともに本菌の病原因子と考えられている。劇症型A群レンサ球菌感染症(TSLS)患者由来株の全菌体外分泌蛋白を抽出し、2次元電気泳動によって展開することにより多数の分泌蛋白のスポットを分離することができた。また、それぞれのM型に属する株は似た2次元パターンを示した。このことは、同じM型に属する株はよく似た病原性を示すことを示唆している。しかし、引き起こした病像の異なる株間でパターンにやや差が見られた。2次元電気泳動によって分離した多数のスポットのN末端アミノ酸配列の決定を行い、データベースに基づいてSpeB、SpeF、ストレプトリジン0など多くの蛋白を同定した。また、多くの未報告の病原性に関連すると考えられている分泌蛋白を検出した。現在既にその中の4種の遺伝子に関してDNAクローニングが終了し、塩基配列の決定ならびにリコンビナント蛋白の作成を行い、未報告のDNA分離酵素であることを確認した。ARDS発症に関わる可能性が示されたSpeFはM1、M3株(TSLS由来株)において比較的強いスポットであり、等電点の異なる複数のスポットとして検出された。この複数のスポットについてさらに解析を進めている。

研究成果

• [文献書誌] T.Horii: "The staphlokinase gene is located in the structural gene encoding N-acetylmuramyl-L-alanine amidase in methicillin-resistant Staphylococcus aureus"FEMS Microbiol.Lett. 185. 221-224 (2000)
• [文献書誌] K.Kawamura-Sato: "Effect of subinhibitory concentrations of macrolides on expression flagellin in Pseudomonas aeruginosa and Proteus miradilis"Antimicrob.Agents Chemother. 44. 2869-2872 (2000)
• [文献書誌] M.Yokota: "Fatal rapidly progressing Streptococcal toxic shock-like syndrome : case report"Jpn.J.Infect.Dis. 53. 81-82 (2000)
• [文献書誌] K.Mase: "Firm Adherence of Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis to Humann Hair and Effect of Detergent Treatment"Microbiol.Immunol. 44. 653-656 (2000)
• [文献書誌] Y.Kawano: "Rapid isolation and identification of staphylococcal exoproteins by reverse phase capillary high performance loquid chromatography-electrpspray inonization mass spectrometry"FEMS Microbiology Letters. 189. 103-108 (2000)
• [文献書誌] Y.Kawano: "Proteolytic cleavage of staphylococcal exoproteins analyzed by two-dimensional gel electrophoresis"Microbiol.Immunol. (in press).
• [文献書誌] 太田美智男: "院内感染テキスト"へるす出版. 246 (2000)