| 研究概要 |
1。3つのタイプのSCCmecの全塩基配列の決定と遺伝子の検索。
Type1-SCCmec(NCTC10442),Type-IISCCmec(N315)の全塩基配列に引き続いてTYPE-IIISCCmec(85/2082)の全塩基配列を決定した。三つのTypeのSCCmecの長さは、Type-I,34kb,Type-II,52kb,Type-III,67kbとそれぞれ異なっており、塩基配列の上でもそれぞれのTypeに特異的な領域が存在した。しかし、この三つのTypeのSCCmecには共通した以下の特徴が存在する。:(1)両末端の特徴的な塩基配列(両端のinverted repeat sequence,及び左端末端に隣接する染色体部位とSCCmecの右端末端とに存在するdirect repeat sequence)(2)mecI-mecR1-mecAあるいはΔmecR1-mecA遺伝子複合体の存在。(3)SCCmecの転移に関与する部位特異的組み換えに関与する二つのORF,cassette chromosome recombinase(ccrA,ccrB)の存在である。
2。mobile genetic elementとしてのSCCmec.
ccrA,ccrBを温度感受性plasmid pYT3にクローニングしたplasmid,pSRを作成し、N315にエレクトロポレーションで挿入した結果、SCCmecは部位特異的に脱落すること、脱落に伴って、環状中間体を生成することを見いだした。この環状中間体上のSCCmecと組み換えをおこす部位をさきのplasmid,pSRにクローニングし、pSRattを作成し、MSSAに同様にエレクトロポレーションで挿入すると、pSRattが染色体状に部位、及び方向特異的に挿入されることを見いだした。この脱落と挿入はccrA及びccrBのいづれか一方を欠落させると、起こらなくなるため、両遺伝子の存在が必要であることが証明された。
CcrA,CcrB蛋白の性質、SCCmecの伝達の具体的な証明は、検討を継続中である。
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