マウスにおけるC型肝炎ウイルス(HCV)感染モデルの作製とワクチン効果の判定

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11670290
• 研究機関: 三重大学
• 研究代表者: 保富 康宏 三重大学, 医学部, 助教授 (90281724)
• キーワード: C型肝炎ウイルス(HCV) / 細胞傷害性Tリンパ球 / 動物モデル / ワクチン

研究概要

1.マウスにおけるHCV感染モデルの作製: マウス肝臓に対しHCV構造蛋白のDNAを直接接種し、HCV感染と同様の状態を作製することを試みた。マウス肝にHCVDNAを電気刺激を用い接種したところ電極間の肝細胞にHCV構造蛋白が検出された。これら遺伝子導入マウスではヒトHCV感染と同様にHCV特異的細胞傷害性Tリンパ球(CTL)の誘導が認められた。しかしながら肝炎症状はヒトに比べると非常に軽度であった。
2.マウスにおけるHCVワクチンの検討(1)ペプタイドワクチン: ペプタイドワクチンによるHCV特異的CTLの誘導を試みた。マウスにCTLエピトープペプタイド免疫ではCTLは誘導されなかったが、Thエピトープを結合させたTh-CTLではCTLが誘導された。これら免疫マウスにHCV遺伝子組み込みワクシニアウイルスを接種したところThエピトープを含む免疫群でチャレンジ後早期に高いCTL活性を認め、CTLを誘導するにはThエピトープペプタイドを利用することが重要であることが示された。(2)DNAワクチン: DNAワクチンによる免疫誘導が困難であるとされているHCVに対してin vitroで導入遺伝子蛋白の発現が高いelongation factor 1-α(EF1-α)プロモーターを用いたプラスミドによりHCVに対するDNAワクチンを試みた。CMVプロモーターを用いた場合CTLの誘導は3回以上の免疫を必要としたがEF1-αプロモーターを用いた場合は1回の免疫で高い活性のCTLが誘導され、EF1-αプロモーターを用いたDNAワクチンの有効性が示された。

研究成果

• [文献書誌] Matsumoto,J.et al.: "Malaria infection induces rapid elevation of soluble Fas ligand level in serum and subsequent T lymphocytepenia : possible factors responsible for the・・・"Infection and Immunity. (印刷中). (2000)
• [文献書誌] Nishimura,Y.,et al.: "A single immunization with a plasmid encoding hepatitis C virus (HCV) structural proteins under the elongation factor 1-α promoter elicits HCV-specific cytotoxic T lymphocytes(CTL)"Vaccine. 18巻. 675-680 (1999)
• [文献書誌] Hiranuma,K.,et al.: "Helper T cell (Th) determinant peptide contributes to induction of cellular immune responses by peptide vaccine constructs against hepatitis C virus"Journal of General Virology. 80巻. 187-193 (1999)