アラキドン酸および活性酸素代謝レベルからみた胃癌細胞増殖とその制御機構の分子論的解析

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11670526
• 研究機関: 大阪市立大学
• 研究代表者: 荒川 哲男 大阪市立大学, 大学院・医学研究科, 教授 (60145779)
• 研究分担者: 藤原 靖弘 大阪市立大学, 大学院・医学研究科, 講師 (40285292) ; 樋口 和秀 大阪市立大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (20218697)
• キーワード: 大腸癌細胞 / アデノウイルス / MAP kinase / 遺伝子治療 / AP-1 / 細胞内情報伝達

研究概要

すでに樹立化されている大腸癌細胞(HT-29細胞)を使用し、細胞内情報伝達機構であるMAP kinase系の活性化についての検討の中で、そのサブファミリーであるJNKの活性化が、細胞増殖時において著明であることをまず初めに示した。そこで次にJNKの下流に存在する転写因子AP-1が、細胞増殖においても経時的に活性化されてくることが判明した。そこでその選択的阻害性を求めることを目的として、dominant negative mutantの作成を試み、本mutantを組み入れたアデノウイルスが、大腸癌細胞に効率に組み込まれることを確認した後、このウイルスを用いて増殖・アポトーシスに与える影響について検討してきた。その結果、大腸癌細胞増殖はアデノウイルスにより、増殖抑制効果を示し、細胞周期に対してはG1静止に導くことが判明した。次にin vivoにおける効果について検討を行った。ヌードマウスの皮下に大腸癌細胞を移植し、dominant negativeを組み入れたアデノウイルスを局所投与し、その腫瘍体積への変化ならびに組織学的変化、さらには増殖・アポトーシスに関連する細胞周期関連蛋白質発現について検討した。その結果、確実に局所投与による組織発現が認められ、その作用により腫瘍体積の減少、すなわち抗腫瘍効果が示され、腫瘍の増大を有意に抑制した。また、組織学的にも、細胞増殖マーカーであるKi-67染色陽性細胞数の減少が示された。以上のことから、今回作成したdominant negative mutant組み込みアデノウイルスを用いた遺伝子治療は、大腸癌細胞の新たなる治療戦略のひとつとなる可能性が示された。

研究成果

• [文献書誌] Higuchi K et al.: "Is eradication sufficient to heal gastric ulcers in patients infected with Helicobacter pylori? A randomized, controlled, prospective study"Aliment Pharmacol Ther. 17(1). 111-117 (2003)
• [文献書誌] Tominaga et al.: "In vivo action of novel alkyl methyl quinolone alkaloids against Helicobacter pylori"J Antimicrob Chemother. 50(4). 547-552 (2002)
• [文献書誌] Shiba M, et al.: "Efficacy and safety of balloon-occluded endoscopic injection sclerotherapy as a prophylactic treatment for high-risk gastric fundal varices : a prospective, randomized, comparative clinical trial"Gastrointest Endosc. 56(4). 522-528 (2002)
• [文献書誌] Fujiwara Y et al.: "Long-term effect of Helicobacter pylori eradication on quality of life, body mass index, and newly developed diseases in Japanese patients with peptic ulcer disease"Hepatogastroenterology. 49(47). 1298-1302 (2002)
• [文献書誌] Higuchi K et al.: "Effects of ecabet sodium, an antiulcer drug, on gastric adaptive relaxation in isolated guinea-pig stomachs"Drugs Exp Clin Res. 28(2-3). 105-111 (2002)
• [文献書誌] Watanabe T et al.: "Rebamipide prevents delay of acetic acid-induced gastric ulcer healing caused by Helicobacter pylori infection in Mongolian gerbils"Dig Dis Sci.. 47(7). 1582-1589 (2002)