| 研究概要 |
背景と目的:我々はこれまでの研究で以下の点を明らかにしてきた.ヒト肺動脈平滑筋細胞(HPASMC)において1)IL-1βやTNFαなどのサイトカインやLPS刺激によりNOやPGI_2の産生が促進されるが,sodium nitropurusside(SNP)を更に加えることによってHPASMCのPGI_2産生は更に促進し,NO合成酵素阻害薬L-NMMAを加えることによってHPASMCのPGI_2産生は抑制されること,2)IL-6の添加はPGI_2産生を抑制すること,3)IL-1βやLPSによるHPASMCのNO産生の促進効果がIL-6で抑制されることを明らかにした.
本研究においては1)NOによるPGI_2産生の促進効果がいかなる機序によるものであるか,2)IL-6によるNOやPGI_2産生の抑制効果がいかなる機序によるものであるかを検討する.
方法:1)HPASMCをsodium nitroprusside(SNP)やL-NMMAで24時間培養し,培養液中のNOと6-keto-PGF1αを測定した.またLPS(10μg/ml)やIL-1β(200U/ml)を同時に加えた場合も同様に測定した.
2)培養後のHPASMCのCOX-2蛋白の発現をWestern blot法にて検討した.
3)HPASMCを10μg/mlのLPSや200U/mlのIL-1βに4-4000U/mlのIL-6を同時に加え培養した時のNOと6-keto-PGF1αを測定した.2)培養後のHPASMCのiNOS蛋白とCOX-2蛋白の発現をWestern blot法にて検討した.
結果と考察:1)HPASMCをIL-1βで培養するとCOX-2蛋白の発現が明らかとなる.同時にSNPを加えて培養するとHPASMCのCOX-2の発現は増強し,SNPの濃度に依存して増加する傾向がみられた.
2)IL-6がHPASMCのiNOS蛋白やCOX-2蛋白発現を減弱させるか否か現在検討中である.
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