ヒト8型ヘルペスウイルスのケモカイン様遺伝子によるエイズ脳症の予防機序の研究

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11670618
• 研究機関: 山梨医科大学
• 研究代表者: 照沼 裕 山梨医科大学, 医学部, 講師 (50217436)
• 研究分担者: 岩谷 靖雅 山梨医科大学, 医学部, 助手 (90303403) ; 葛西 宏威 山梨医科大学, 医学部, 助手 (20324189)
• キーワード: ヒト8型ヘルペスウイルス / ケモカイン / エイズ / カポジ肉腫 / vMIP

研究概要

1998年にHHV-8に感染しているカポジ肉腫の患者ではエイズ脳症の発症率が低くなるとの疫学的報告が出された。そして、そのメカニズムとして、HHV-8が持つケモカイン様遺伝子ホモログ(vMIPs:vMIP-I、II、III)によりHIV-1のmicrogliaへの感染が阻害されているのではないかと推測されている。しかしながら、vMIPsが実際にmicrogliaやmacrophageへのHIV-1の感染阻害に直接に働く可能性、末梢血中でのmonocyteへのHIV-1の感染阻止に働くことでエイズ脳症の発症を抑えている可能性、vMIPsにより細胞にシグナルが入って免疫系の細胞の活性状態が変化する可能性、この様なケモカイン遺伝子のホモログを使ってエイズ脳症やHIV感染症の進行を予防できる可能性などは全くわかっていない。
我々はHHV8感染細胞株BCBL-1よりPCR法により、vMIP-I、II、III遺伝子を増幅及び単離した。単離した遺伝子は発現ベクター(pcDNA3.1-myc)に組み込み、哺乳類細胞内における、発現系を構築した。一過性に293T細胞内にvMIPs遺伝子を強発現し、この培養上清を用いて、カルシウムの細胞内流入を検討したところ、vMIP-I、-IIIについて反応性が見られた。さらにCos7細胞にvMIPsの発現ベクターを導入し、恒常的なvMIPs産生細胞の樹立に成功した。現在、この細胞株の培養上清より、FPLCによってvMIPsを大量精製単離し、これらの組み換え蛋白を用いて、HIV-1感染に対する影響、宿主免疫系に対する影響を検討している。同時に我々は、患者のカポジ肉腫組織からvMIPs遺伝子を単離し、DNA配列の比較と発現系の構築も行っており、これらの組み換え蛋白での生物活性の比較も進めている。

研究成果

• [文献書誌] Handema,R. 他: "Emergence of new HIV-1 subtypes other than subtype C among antenatal women in Lusaka,Zambia"AIDS Research and Human Retroviruses. (in press). (2001)
• [文献書誌] Owada,T. 他: "Antibody masking renders HIV-1 resistant to the cationic membrane filtration through alteration of its electrostatic character"J.Virological Methods. (in press). (2001)
• [文献書誌] Dai,J.H. 他: "Glycyrrhizin enhances IL-12 production in peritoneal macrophages"Immunology. (in press). (2001)
• [文献書誌] 照沼裕 他: "ザンビアにおけるエイズ治療の足掛かり"化学療法の領域. 16. 483-488 (2000)
• [文献書誌] He,L. 他: "IL-18 and IL-1β productions are decreased in HIV-1-seropositive haemophiliacs but not in HIV-1-seropositive non-haemophiliacs"AIDS Research and Human Retroviruses. 16. 345-353 (2000)
• [文献書誌] Deng,X. 他: "Higher prevalence and viral load of TT virus in saliva than in the corresponding serum : another possible transmission route and replication site of TT virus"J Medical Virology. 62. 531-537 (2000)