アポトーシス抑制因子血漿sFasの投与は心不全の長期予後を改善する

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11670669
• 研究機関: 岐阜大学
• 研究代表者: 西垣 和彦 岐阜大学, 医学部・附属病院, 講師 (60198447)
• 研究分担者: 藤原 久義 岐阜大学, 医学部, 教授 (80115930) ; 竹村 元三 岐阜大学, 医学部・附属病院, 講師 (40283311)
• キーワード: sFasの腹腔内投与 / 血漿sFas / アポトーシス

研究概要

本年度(平成12年度)は、第1に、昨年作成した心筋梗塞後12週令の心不全ラットモデルにおいて、アポトーシス抑制因子である血漿sFas濃度を測定し、アポトーシス関連因子の検討を行った。その結果、心不全ラットにおいて、血漿sFasの上昇がみられることが明らかになった。また、その心筋組織において、アポトーシスのマーカーであるDNA fragmentationの存在を示唆するTUNEL陽性心筋細胞の増大と、アポトーシス誘導因子であるFasおよびBaxのウェスターンによる蛋白レベルならびにPCR、ノーザンおよびin situ hybridizationによるup regulationを認めた。しかし、心筋組織の電顕的観察では、心筋細胞の肥大、変性ならびに核の変形はみられたが、核クロマチンの特異的凝集、細胞のshrinkage、budding、apoptotic body等のアポトーシスを示唆する所見を持った心筋細胞はみられなかった。光顕レベルでのへマトキシリン・エオジン、elastic von GiesonおよびMasson trichrome染色で、線維化など心筋細胞死があったことを示唆する所見があった。また、TUNEL陽性心筋細胞の頻度は1%以下であった。したがって、電顕でのアポトーシス所見の欠如は、心筋細胞にアポトーシスがないことを意味するのではなく、電顕による観察領域があまりに小さいためと思われた。
第2に、上記の心不全ラットモデルにsFasを腹腔内投与を行った。しかし、血漿sFasに有意の持続的上昇を生じるには至らず、心不全の改善効果も確認できなかった。これは、血漿sFasのターンオーバーが予想より早く、我々の用いたsFasの腹腔内投与では、血漿sFasレベルの増大が期待できないためと思われる。したがって、血漿sFas濃度を長期にわたり持続的に上昇させるためには、特に心筋組織においてそれを可能にするためには、本研究における腹腔内投与法では限界があり、sFasの遺伝子治療が必要と思われる。

研究成果

• [文献書誌] Kanoh,Motoo: "Significance of myocytes with positive DNA in situ nick end labeling (TUNEL) in hearts with dilated cardiomyopathy : not apoptosis but DNA repair"Circulation. 99. 2757-2764 (1999)
• [文献書誌] Yokoya,Koichi: "Process of progression of coronary arterial lesions from mild or moderate stenosis into severe stenosis - A study based on four serial coronary arteriograms per year -"Circulation. 100. 903-909 (1999)
• [文献書誌] Matsubara,Tetsuo: "Three Minutes, but Not One Minute, Ischemia and Nicorandil Have a Preconditioning Effect in Patients with Coronary Artery Disease"Journal of the American College of Cardiology. 35. 345-351 (2000)
• [文献書誌] Kanoh,Motoo: "The significance of expression of proliferating cell nuclear antigen in the cardiovascular system : Mitosis or DNA repair?"Circulation. 101. e239-a (2000)
• [文献書誌] Takatsu,Hisato: "Cardiac Sympathetic Denervation from the Early Stage of Parkinson's Disease -Clinical and Experimental Studies with Radiolabeled MIBG-"Journal of Nuclear Medicine. 41(1). 71-77 (2000)
• [文献書誌] Ojio,Shinsuke: "Considerable Time from the Onset of Plaque Rupture and/or Thrombi until the Onset of Acute Myocardial Infarction in Human. -CAG Findings within One Week before the Onset of Infarction-"Circulation. 102. 2063-2069 (2000)