先天性ケトン体代謝異常症の分子病態-サフシニル-CoA:3ケト酸CoAトランスフェラーゼ欠損症を中心として-

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11670754
• 研究機関: 岐阜大学
• 研究代表者: 深尾 敏幸 岐阜大学, 医学部・附属病院, 助手 (70260578)
• 研究分担者: 伊上 良輔 岐阜大学, 医学部・附属病院, 助手 (60273132) ; 祐川 和子 岐阜大学, 医学部, 助手 (60115409)
• キーワード: β-ケトチオラーゼ欠損症 / T2欠損症 / サクシニル-CoA:3ケト酸CoAトランスフェラーゼ / サクシニル-CoA:3ケト酸CoAトランスフェラーゼ欠損症 / ミトコンドリア.アセトアセチル-CoAテオラーゼ / 遺伝子変異 / 発現調節

研究概要

SCOT遺伝子の構造,配列を明らかにし,ヒトSCOT蛋白の3次構造モデルを作成し,3人のSCOT欠損症患者の遺伝子変異を同定,その特徴を明らかにした(論文投稿中).ゲノム遺伝子の配列をあきらかにしたことで,SCOT欠損症患者遺伝子変異のゲノムDNAでのスクリーニングを可能とした.肝臓でのみ発現していないSCOT遺伝子の発現調節機構の解明においては,エクソン1上流域3kbの塩基配列決定し,5'からの欠失フラグメントをPCRを用いて作成し,ルシフェラーゼアッセイベクターに組み込んで,エレクトロポーションを用いてHela細胞にトランスフェクションして,近位部における2つのGCボックスにSP1蛋白が結合することが基本的なSCOT遺伝子発現に必要であることを明らかにした(第42回日本先天代謝異常学会にて発表).さらに肝臓由来の細胞としてHepG2細胞を用いて同様の実験を行い,肝臓特異的発現抑制機構に関与するシスエレメントの解析を進行中である.またT2欠損症については,昨年度同定したスペイン5症例の遺伝子変異について変異の特徴を3次構造モデルを用いて検討し報告した(第42回日本先天代謝異常学会にて発表,投稿準備中).これまでの遺伝子変異スクリニーングを中心にまとめ,Methods in Enzymologyの324巻のBranched chain amino acid,part BにMolecular and enzymatic methods for detection of genetic defects in the distal pathways of branched-chain amino acid metabolismという章を共著で執筆した.ケトン体代謝異常症の臨床,生化学,分子病態について,Molecular and Metabolic Bases of Inherited Disease(8th edition)のInborn errors of ketone body catabolismという章を共同執筆した.

研究成果

• [文献書誌] Fukao T.: "ATM is upregulated during the mitogenic Response in peripheral blood mononuclear cells"Blood. 94・6. 1998-2006 (1999)
• [文献書誌] Fukao T.: "Immunoblot analysis for laboratory diagnosis of Ataxia-telangrectasia:use of Epstein-Barrvirus transformed or phytohemagglutinin-stimlated lympholasts"Journal of Investigational Allergology and Clinical Immunology. 10(in press). (2000)
• [文献書誌] Watanabe H.: "Molecular Bases of very-long-chain acyl-CoA dehydrogenase deficiency:Identification of a complex mutant allele with P65L and K247Q mutations,theformer being an exonic mutation causing exon 3 skipping"Human Mutation. (in press). (2000)
• [文献書誌] Kaneko H.: "Expression of the BLM gene in human haematopoietic cells"Clin.Exp.Immunol. 118. 285-289 (1999)
• [文献書誌] Inoue R.: "Time-course study of the levels of urimary leukotriene E4,serum thromboxane B2 and serum eosingihil cationic protein in spentaneous asthima attacks in fire children."Journal of Investigational allergology and Clinical Immunology. 9・6. 361-366 (1999)
• [文献書誌] 浦澤林太郎: "急激な意識障害で発症したβ-ケトチオラーゼ欠損症の1乳児例"日本小児科学会雑誌. 103・8. 849-852 (1999)
• [文献書誌] Gibson K.: "Molecular and enzymatic methods for detection of genetic defects in the distal pathways of branched-chain amino acid metabolism In Branched Chain amino acids,part B"Academic Press(in press).
• [文献書誌] Mitchell GA: "Inborn errors of Ketone body catabolism. In Molecular and Metabolic Bases of Inherited Disease"McGraw-HIll Inc(in press).