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2001 年度 研究成果報告書概要

Electroporationを用いた血管に対する遺伝子治療の基礎研究

研究課題

研究課題/領域番号 11670888
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 放射線科学
研究機関神戸大学

研究代表者

山田 和成  神戸大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (00278962)

研究分担者 佐々木 良平  神戸大学, 医学部・附属病院, 助手
森 岳樹  神戸大学, 医学部・附属病院, 助手 (40335435)
杉本 幸司  神戸大学, 医学部・附属病院, 講師 (90314476)
研究期間 (年度) 1999 – 2001
キーワードelectroporation / gene transfer / imaging guidance
研究概要

(目的)electroporationを用いた血管への遺伝子導入を容易にする方法を開発すること。
(方法)1:経皮的に挿入可能なelectroporation needleを作成し、家兎の大腿筋肉に遺伝子を導入した。electroporation needleは1cm間隔の2本の22G針を外套とし、その中に電極を挿入、さらに2本の外套針の中央に遺伝子注射針をセットし作製。家兎の大腿筋肉にイメージガイドなしで外套を筋肉内に挿入し、さらに電極を挿入、green fluorescent protein(GFP)遺伝子注入後にelectroporation施行。3日後に、遺伝子の導入を確認した。
2:イメージガイド下に遺伝子導入針を家兎の大腿筋肉に挿入し、遺伝子導入を導入した。CTガイド下に遺伝子導入針とelectroporation needleの針先を確認しながら、大腿筋に挿入、遺伝子導入針からGFP遺伝子を注入後にelectroporation施行。3日後に遺伝子の導入を確認した。
3:経皮経血管的に挿入可能なelectroporationバルーンカテーテルモデルをデザインし、生体に応用可能かを検討した。また、バルーンカテーテルを、イメージガイド下に家兎の大腿動脈、腎動脈に挿入し、視認性、留置による血管壁への影響について検討した。
(結果)イメージガイドなし、イメージガイド下ともに挿入されたelectroporation needle間に一致した遺伝子発現が確認された。イメージガイドなしではneedle挿入時の位置確認ができず、筋肉内での正確な位置をあらかじめ決定することは困難であった。
electroporationバルーンカテーテルモデルについては、a)バルーンに平行してelectroporation電極ワイヤーを装着し、バルーン拡張によりワイヤーを血管壁に圧着させるデザイン、b)血管内でバルーンから血管壁に垂直にelectroporation needleが刺入できるようなデザインの2種類を考案して検討したが、サイズ、挿入方法等について、生体内で応用可能とするためには現時点では困難であり、さらに改良、検討が必要と考えられた。

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公開日: 2003-09-17  

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