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細胞死の研究が進歩しアポトーシスが重要な役割を占めることが明らかになり、疾患の特性のみならずその治療にも関与していると考えられる。さらにアポトーシスと癌遺伝子p53との関連が明らかになりつつある。われわれはラット卵黄嚢腫瘍から得た放射線感受性細胞のNMT-1と同細胞由来の放射線抵抗性細胞のNMT-1Rを用いて放射線感受性の機序とアポトーシスとの関連について研究してきた。NMT-1はNMT-1Rに比べ1.7倍(D0値比較で)の放射線感受性を有しており、10Gy照射後12〜24次間後にNMT-1でアポトーシスの出現が認められている(これに対しNMT-1Rではアポトーシスは照射後ほとんど認められない)。
次に照射後のp53、p21、baxの発現を検討した。放射線感受性細胞NMT-1ではp53とp21の発現が10Gy照射1時間後に増加しているのが確認された。さらにbaxの発現も増加した。これに対し放射線抵抗性細胞NMT-1Rではp53、p21、baxのいずれも照射後、発現の増加は認められなかった。PCR-SSCP法にて両細胞p53について解析した結果、放射線感受性細胞NMT-1では野生型p53を発現しているのに対して、放射線抵抗性細胞では変異型p53の発現が認められた。今年度はラット野生型p53をベクターに組み込むことが可能になりつつある。来年度はベクターに組み込んだラット野生型p53を用いて放射線抵抗性細胞NMT-1Rに導入し、放射線感受性の変化について検討し、同細胞由来NMT-1と遺伝子発現を含め比較検討する。
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