自己免疫性再生不良性貧血における自己抗原の同定

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11670987
• 研究機関: 金沢大学
• 研究代表者: 中尾 眞二 金沢大学, 医学部, 教授 (70217660)
• 研究分担者: 中畑 龍俊 東京大学, 医科学研究所・癌病態研究部, 教授 (20110744)
• キーワード: 再生不良性貧血 / 細胞傷害性T細胞 / 発作性夜間血色素尿症 / GPIアンカー膜蛋白

研究概要

自己免疫性再生不良性貧血における自己抗原を同定するため,患者骨髄から単離したCD4陽性T細胞クローンZNIとcombinatoryなランダムペプチドライブラリーを用いて標的ペプチドの同定を試みたが,血液細胞に関連の深い分子の同定には至らなかった.CD4陽性T細胞のエピトープを同定する新たな方法として,CLIP置換型ペプチドライブラリーが開発されたので,現在これを用いてZNIの標的ペプチドを検討中である.このプロジェクトに関連して,細胞傷害性T細胞による造血幹細胞への攻撃が,in vivoにおいて起こっていることを証明するために,再生不良性貧血患者の骨髄から単離した細胞障害性T細胞(cytotoxic T lymphocytes.CTL)クローンNT4.2を用いて,EBウイルスで形質転換した自己B細胞に対する細胞障害活性のメカニズムを検討した.その結果,細胞傷害活性が起こるためには,CD58やCD59などのglycosylphosphatidylinositol(GPI)アンカー膜蛋白を標的細胞が発現している必要があることが示された.再生不良性貧血の発症に造血幹細胞に対するCTLが関与しているとすれば,このようなGPIアンカー膜蛋白を欠失しているparoxysmal nocturnal hemoglobinureia (PNH)形質の幹細胞はCTLの攻撃を免れて生き残る可能性がある.そこで,100人の再生不良性貧血患者末梢血について,CD55・CD59を欠失している顆粒球の有無を高感度のフローサイトメトリーを用いて検討したところ,発症後間もない再生不良性貧血患者の88.6%にこのようなPNH顆粒球の増加が認められた.このPNH顆粒球の割合は,免疫抑制療法後の血液学的回復にともなってほとんどの例で著明に減少した.したがって,多くの再生不良性貧血患者では造血不全の発症にCTLが関与していると推察された.

研究成果

• [文献書誌] Wang H et al.: "Relative increase of granulocytes with a paroxysmal nocturnal haemoglobinuria phenotype in oplastic anaemia patients : the high prevalence at diagnosis"Eur J Haemaol. (in press). (2001)
• [文献書誌] Chuhjo T et al: "Successful treatment of persistent erythroid aplasia caused by parvovirus B19 infection in a patient with variable immunodeficiency with low-dose immunoglobulin"Am J Hematol. 60. 222-224 (1999)
• [文献書誌] Takami A et al: "Cytotoxicity against lymphoblastoid cells mediated by a T-cell clone from an aplastic annemia patient : role of CD59 on target cells"Br J Haematol. 107. 791-796 (1999)
• [文献書誌] Azenishi Y et al: "CD59-deficient blood cells and PIG-A gene abnormalities in Japanese patients with aplastic anemia"Br J Haematol. 104. 523-529 (1999)
• [文献書誌] Zeng W et al: "Characterization of T-cell reperroire in the bone marrow of immune-mediated aplastic anemia : evidence for the involvement of antigen-driven T cell response in cyclosporine-dependent aplastic anemia"Blood. 93. 3008-3016 (1999)
• [文献書誌] Takami A et al: "Impaired response of granulocyte-committed progenitor cells to stem cell factor and granulocyte Colony-stimulating factor in human cyclic neurropenia"78. 197-199 (1999)