造血器腫瘍の悪性化に関わる新しい遺伝子増幅機構の分子遺伝学的研究

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11671000
• 研究機関: 広島大学
• 研究代表者: 田中 公夫 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 助手 (70116622)
• キーワード: 白血病 / 悪性リンパ腫 / 染色体異常 / 遺伝子増幅 / FISH法 / 染色体微細切断法 / MYC遺伝子

研究概要

これまで、複雑染色体異常を持つ135症例で8領域にSJT(segmental jumping translocation)を確認している。1,今年さらに30症例の白血病と悪性リンパ腫について全異常を検出できるSKY FlSH法をもちいて観察を行い、これまで見つかっている8領域以外にさらに5個の染色体領域にSJTを検出した。それらの領域は1q22-q32、2q22-q25,3q24-q27,5q22-q32,20番染色体20q21-q22であった。2,8q24,11q13,11q22-23、21q22の4領域のSJTについて、領域近傍の約10種のcosmid,YACプローブをもちいてFlSH法を行い、共通に増幅している領域を検出した。その結果、8q24のSJTではMYC遺伝子を含むCc8-10-Cc8-134までが、11q13のSJTではcyclin D1を含む領域で11q13.1-q13.3のlNT2-Cc11-534までが、11q22-q23のSJTではCc11-526-Cc11-554の広い範囲が、21q22のSJTではAML-1を含まず、よりテロメア側のD12S239を含む領域が共通であった。また共通領域内にテロメア、サブテロメア領域は含まれていなかった。3,またこれら2領域内で高率に発現をしている既知の遺伝子を検索した。8q24のSJTでは悪性リンパ腫ではMYC遺伝子が遺伝子レベルの増幅数に一致して高い発現をしていたが、白血病では発現量は低く、MYC遺伝子以外の遺伝子が関与していると考えられた。また11q13のSJTでは悪性リンパ腫で、cyclinD1の高い発現が観察され、SJT内で関与している遺伝子と考えられた。4,SJTを持つ2個の細胞株にてmicrodissection法でSJTの共通領域を微細切断し、同時にcDNA libraryを作成し高度に発現をしている遺伝子を検出する。(2)microdissection法で検出したDNA断片を増幅し、SJTに特異的な領域をmulticolor FlSH法で検出する方法の予備実験をしている。

研究成果

• [文献書誌] Tanaka K et al: "Tianspositionn of duplicated chromosomal segment inyolying fused BCR-ABL gene or ABL oncogene alone in chronic myelocytic leukemia and Ph chromosome-positive acute leukemia with complex karyotypes."Cancer Genet Cytogenet. 118. 1-7 (2000)
• [文献書誌] Tanaka K et al: "Loss of a region, RB, D13S319, D13S25 locus in myeloid leukemias wit deletion/translocation at 13q14 of chromosome 13, but not in lymphoid malignancies."Leukemia. 13. 1367-1373 (1999)
• [文献書誌] Tanaka K et al: "Pitfalls of G-banding analysis-with special reference to underestimation of chromosomal aberration rates."Cancer Genet Cytogenet. 115. 32-38 (1999)
• [文献書誌] Tanaka K et al: "Detection of 8;21 translocation on interphase cells from acute myelocyiic leukemia by fluorescence in situ hybridization and its clinical application."Cancer Genet Cytogenet. 113. 29-35 (1999)
• [文献書誌] Nakanishi M, Tanaka et al: "Chromosomal instability in acute myelocytic leukemia and myelodysplastic syndrome patients among atomic bomb survivors"J Radiat Res. 40. 159-167 (1990)
• [文献書誌] Kumaravel TS, Tanaka K et al: "Hidden genetic alteration in acute myeloid leukemia patients with a normal karytype"Leukemia and Lymphoma. (in press). (2000)