腎糸球体上皮細胞足突起間のスリット膜の透過性制御機構の解析

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11671031
• 研究機関: 新潟大学
• 研究代表者: 河内 裕 新潟大学, 医学部, 助教授 (60242400)
• 研究分担者: 折笠 道昭 新潟大学, 医学部, 助教授 (30185681) ; 清水 不二雄 新潟大学, 医学部, 教授 (40012728)
• キーワード: 糸球体 / 上皮細胞 / スリット膜 / 蛋白尿 / 5-1-6抗体 / ネフリン

研究概要

糸球体上皮細胞足突起間のスリット膜の構造、機能の解析を目的として研究を続けてきた。これまでの検討で、(1)蛋白尿惹起抗体5-1-6認識抗原がスリット膜上に存在すること、(2)蛋白尿出現時、5-1-6認識抗原、並びにスリット膜の基部に存在するZO-1の蛋白発現量が低下していること等を明らかにしてきた、昨年度は、先天性ネフローゼ症候群の責任遺伝子の産物として同定され、スリット膜構成蛋白の1つではないかと報告されたネフリンのラットhomologueのcloninngを行ない、その詳細な局在、5-1-6抗体認識抗原、ZO-1との異同、各種実験モデル、成熟途上期の糸球体におけるネフリンの発現などの解析を行い、5-1-6抗体は、ネフリンのextracellular siteを認識しているとの結論に達した。本年度(平成12年度)は、Westem blot法での定量法を用い各種病態でnephrin発現変化と透過性制御能との関係の検討を行い、一連の研究結果をKidney Int 2000年5月号にまとめた。さらに、nephrin発現とスリット膜構造維持との関係を検討するため、各種病態モデルの糸球体上皮細胞スリット膜構造を電子顕微鏡を用い詳細に検討し、足突起間距離の定量を行なった。Nephrin発現は、糸球体透過性制御の維持には重要であるが、スリット膜構造維持には、不可欠ではないとの結論を得た。これら一連の研究結果は、2000年10月にトロントで開催された北アメリカ腎臓学会に報告した。また、ネフリン分子各fragment cDNAをCOS cellにtransfectionさせる系を用い、5-1-6抗体認識eiptopeの同定を進めている。これまでの検討でepitopeは、nephrinのextracellular site中央部の400アミノ酸からなる部位にあると考えられる。

研究成果

• [文献書誌] Kawachi H: "Cloning of rat nephrin : Expression in developing glomeruli and in proteinuric states"Kidney Int. 57. 1949-1961 (2000)
• [文献書誌] Ikezumi Y: "Treatment of anti-CD5 monoclonal antibody ameliorates proteinuria and glomerular lesions in rat mesangioproliferative glomerulonephritis"Kidney Int. 58. 100-114 (2000)
• [文献書誌] Kikuchi H: "Severe proteinuria, sustained for 6 months, induces tubular epithelial cell injury and cell infiltration but not progressive interstitial fibrosis"Nephrol Dial Transplant. 15. 799-810 (2000)
• [文献書誌] Li P: "The prevention of glomerulosclerosis in rats using traditional Chinese medicine, Sairei-to"Nephrology. 5. 83-89 (2000)
• [文献書誌] Kawachi H: "Molecular composition and function of the slit diaphragm : nephrin, the molecule responsible for proteinuria"Clin Exp Nephrol. 4. 161-172 (2000)
• [文献書誌] 河内裕: "Nephrinとネフローゼ"医学のあゆみ. 193. 66-70 (2000)
• [文献書誌] Watanabe T: "Glomerular infiltration of CD8 positive cells predicts progression of IgA nephropathy"Pedicatric Nephrol. (in press).
• [文献書誌] Oyanagi A: "Crescent forming mechanism in an irreversible Thy-1 model in rats"Nephron. (in press).
• [文献書誌] Salant D: "Immunologic Renal Discases, 2nd Edition"Lippincott Williams & Wilkins. 375 (2000)
• [文献書誌] 河内裕: "Annual Review 2001腎臓"中外医学社. 251 (2001)