| 研究概要 |
近年MODYにおけるHNF(Hepatocyte nuclear factor)-1α、1β、4αおよびglucokinase遺伝子の異常が明らかとなっている。ヒトHNF-3β遺伝子構造の決定、日本人MODY患者における遺伝子変異スクリーニングおよびその結果得られた変異HNF-3β遺伝子について機能解析を行った。<対象>69名の日本人MODY患者DNAおよび70名の日本人非糖尿病者DNAに対し,変異スクリーニングを行った。<方法>HNF-3β遺伝子構造とpromoter領域の塩基配列を決定し、変異スクリーニングの結果同定されたHNF-3β遺伝子に関して、正常HNF-3βcDNAにそれぞれの変異を導入しHNF-1αおよび4αの5'上流領域断片を用いて機能解析を行った。<結果>ヒトHNF-3β遺伝子は3exonからなり、蛋白は458個のアミノ酸で構成されマウスHNF-3βとは約98%の相同性を示した。また5'上流領域にはHNF-3β自身およびHNF-6蛋白の結合部位を認めた。日本人MODY患者に対するスクリーニングの結果、4種の多型および2種のミスセンス変異(S109N,A328V)を認め、特にS109Nは種を超えて高い保存性が認められた。HNF-3βはHNF-1αおよびHNF-4α遺伝子の転写を有意に増加させ(p<0.01)、それぞれの転写を調節していることが示唆された。またS109Nは、HeLa細胞において正常3βに比しHNF-1αの転写を有意に低下させた(P<0.05)。<結論>ヒト完全長HNF-3β遺伝子をクローニングした。HNF-3βがHNF-1αおよび4α遺伝子の転写を調節していること、また変異HNF-3βがHNF-1αの転写を低下させることを認めた。<新知見>HNF-3β遺伝子が糖尿病発症に関与している可能性が示唆された。
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