| 研究課題/領域番号 |
11671164
|
|---|
| 研究機関 | 山口大学 |
|---|
研究代表者 |
藤岡 顕太郎 山口大学, 医学部・附属病院, 講師 (80238542)
|
|---|
| 研究分担者 |
善甫 宣哉 山口大学, 医学部, 助教授 (00206666)
江里 健輔 山口大学, 医学部, 教授 (10034943)
|
|---|
| キーワード | caveolin / チロシンリン酸化 / Western blot / 免疫沈降 |
|---|
| 研究概要 |
{方法}
1.ウシ大動脈内皮細胞(BAEC)に1分間60サイクルで150mmHgの陰圧をかけCyclic strainを2、5、10、30分、4時間負荷した。負荷をかけたBAECから蛋白を抽出した。蛋白を電気泳動にかけた後、Western blot法により抗カベオリン抗体を用いてカベオリン蛋白濃度を測定した。同様の蛋白を抗カベオリン抗体で免疫沈降した後、Western blot法によりチロシンリン酸化抗体を用いて、カベオリンのチロシンリン酸化を検討した。カベオリンのチロシンリン酸化のpositive controlとしてpervanadateをBAECに負荷したものを用いた。
2.Filipin 0.2μg/mlを加えたBAECとそうでないBAECにCyclic strain負荷を1、3、5日間かけ2群間の細胞数を比較した。
{結果}
1.Cyclic strain負荷においてコントロールを含めて負荷時間に関わらずカベオリンの蛋白濃度は一定であった。
2.Cyclic strain負荷においてカベオリンのチロシンリン酸化は認められなかった。pervanadate負荷ではカベオリンのチロシンリン酸化が認められた。
3.FilipinはBAECの増殖を抑制しなかった。
|
