胆道・膵領域癌における分子生物学的診断に基づく治療体系の確立に関する基礎的研究

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11671255
• 研究機関: 大分医科大学
• 研究代表者: 北野 正剛 大分医科大学, 医学部, 教授 (90169871)
• 研究分担者: 川野 克則 大分医科大学, 医学部, 講師 (00274754) ; 荒巻 政憲 大分医科大学, 医学部, 助手 (10291543)
• キーワード: 膵・胆道領域癌 / 微小転移 / 分子生物学 / K-ras / 突然変異

研究概要

膵・胆道領域癌は進行癌で発見されることが多いため、切除不能となる症例も多く存在する。そのため、prospective studyである本研究において、現時点までに切除症例のサンプル採取が十分でないのが現状である。具体的には、現在までに、膵癌6例、下部胆管癌7例、十二指腸乳頭部癌1例の癌部・非癌部の新鮮凍結標本を、また、膵癌2例、下部胆管癌3例、十二指腸乳頭部癌3例の術前末梢血、術中門脈血を採取・保存し、DNAの抽出を行っている。今後、それぞれのサンプルで、nested PCRを応用したアレル特異的増幅法(nested MASA法)を用いK-ras遺伝子codon12の突然変異を検索し、分子生物学的な検討を行うこととしている。
また、本研究の予備実験として、さらにはnested MASA法の技術の安定化を目的とし、当科における過去の膵癌切除症例と膵管胆道合流異常合併胆嚢癌切除症例のK-ras遺伝子突然変異の検索を行った。それぞれのDNAをパラフィン包埋ブロックより抽出し、nested MASA法を施行した結果、膵癌で78.4%(40/51)、膵管胆道合流異常合併胆嚢癌で88.9%(8/9)にK-ras遺伝子突然変異を認めた。
さらに、今後これらの分子生物学的診断をリアルタイムPCRを用い術中迅速にて行うことを目的とし、これまで3例の膵頭十二指腸切除症例の術中に、腫瘍部に色素を注入、下膵頭後部リンパ節を同定、サンプリングし、短時間でDNA・RNAが抽出できることを確認した。

研究成果

• [文献書誌] Yoshida T,Shibata K,Yokoyama H,Moril Y,Matsumoto T,Kitano S: "Patterns of lymph node metastasis in carcinoma of the distal bile duct."Hepato-Gastroenterology. 46・27. 1595-1598 (1999)
• [文献書誌] Yoshida T,Shibata K,Matsumoto T,Sasaki A,Hirose R,Kitano S: "Carcinoma of the galibiadder associated with anomalous junction of the pancreaticobillary duct in adults."Journal of the American College of Surgeons.. 189・1. 57-62 (1999)
• [文献書誌] Yoshida T,Matsumoto T,Sasaki A,Aramaki M,Kawano K,Kitano S: "Peritoneal recurrence of ampullary carcinoma following curative pancreatoduodenectomy."Hepato-Gastroenterology. 46・30. 3274-3275 (1999)
• [文献書誌] Yoshida T,Matsumoto T,Shibata K,Yokoyama H,Morli Y,Sasaki A,Kitano S: "Patterns of lymph node metastasis in carcinoma of the ampulla of Vater."Hepato-Gastroenterology. 47・33. 880-883 (2000)
• [文献書誌] Yoshida T,Matsumoto T,Sasaki A,Morli Y,Shibata K,Ishio T,Kitano S: "Laparoscopic choiecystectomy in the treatment of patients with gallbladder cancer."Journal of the American College of Surgeons.. 10・7. 1106-1113 (2000)