| 研究概要 |
本研究では、これまでの研究に続いて、基礎的に各種サイトカインの刺激に対するG細胞からのガストリン分泌、産生機序を解明し、さらに、ヒト胃癌切除標本よりG細胞の単離・初代培養系を作成し、サイトカインに対する反応が同様に得られるかどうか、その機序を解明することが目的である。われわれがこれまで開発してきたPercoll密度勾配遠心法により得られたモルモットG細胞の単離、初代培養系を用い、サイトカインの刺激実験を行った(モルモット幽門洞粘膜をDispase,Collagenase酵素処理後、細胞浮遊液をPercoll密度勾配遠心法(不連続勾配)によりG細胞のrich分画を同定した。同分画より得られたG細胞浮遊液をcollagen type 1でcoatされたcultue wellに播種し、DMEM/F12(1:1)培養液に36時間培養、単層培養系を作成した後、各種cytokineの刺激実験(2時間)を行った。培養液中と細胞内のガストリン濃度を測定した)。その結果、炎症性サイトカインであるIL-1β,-6,-8 TNF-αが濃度依存性にガストリン分泌を促進する事が確認された。
現在、インフォームドコンセントの下、ヒト胃癌切除標本の幽門洞粘膜から酵素処理を行い、ヒトG細胞のrich分画を得るため基礎的実験を進行中である。
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