研究課題/領域番号 |
11671314
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研究機関 | 福井医科大学 |
研究代表者 |
田中 國義 三重大学, 医学部・附属病院, 講師 (70144251)
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研究分担者 |
矢田 公 三重大学, 医学部, 教授 (80093152)
西川 政勝 三重大学, 医学部・附属病院, 講師 (30144257)
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キーワード | 血小板 / 体外循環 / Flow cytometry / Glycoprotein Ib / Glycoprotein IIb / IIIa / GMP-140 / PAC-1 / Aurintricarboxylic acid |
研究概要 |
1.Flow cylometryによる活性化血小板の検出過程として、血小板の活性化を正確に評価するために、固定前に抗体と反応させる未固定全血によるflow cytometry検出法を確立させた。 2.塩化ビニール製チューブとローラーポンプを組み合わせた体外循環模擬回路を用いて、ヒトから採血した血液をリンゲル液で希釈し循環させた。循環中経時的に採血し、血小板粘着レセプターGlycoprotein Ib(GPIb)、Glycoprotein IIb/IIIa(GPIIb/IIIa)、GMP-140(P-selectin)、PAC-1(activated GPIIb/IIIa)をそれぞれ未固定全血によるflow cytometry検出法により測定した。GPIbは経時的に低下し、GPIIb/IIIaはほとんど変化なく、P-selectin、PAC-1は経時的な増加を認めた。 3.Aurintricarboxylic acid(ATA);von Willcbrand factor(vWF)antagonistはGPIbとvWFの結合を阻害する。その効果を評価するためにATAを5〜400μg/mlの濃度でリストセチン惹起血小板凝集能をAG10 aggregometerにて測定した。75μg/mlにて有意に凝集抑制効果を示した。 4.今後の研究計画として、薬剤(ATA、Reopro: GPIIb/IIIa antagonistなど)を体外循環中に投与することでの血小板活性を抑制し,体外循環後の血小板機能の保護効果について検討する。また血小板活性化の評価としてProcoagulant activityの主体と考えられているmicroparticleおよびフォスファチジルセリン(PS)のflow cytometryによる検出を追加する。
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