| 研究概要 |
1.survivinアミノ酸配列よりポリペプチドを合成し、それを抗原としてウサギポリクローナル抗体、マウスモノクローナル抗体を作製した。しかし、作製した抗体はsurvivinを認識せず、蛍光抗体、免疫組織化学で増殖する細胞と癌細胞の核と細胞質に強く反応した。Western blotでは、22,60,85kdにバンドが見られた。
2.マウスモノクローナル抗体を2回サブクローニングした。この抗体をY-49と呼ぶことにした。Western blotでは、22kdのバンドがより濃く鮮明となった。
3.flow cytometryで、増殖細胞のY-49標識率を検討した。PHA刺激正常ヒトリンパ球を用いてY-49標識率を検討したところY-49はS,G2/Mに強く標識された。
4.免疫組織化学で各臓器と悪性腫瘍におけるY-49陽性所見を検討した。リンパ節、食道、胃、大腸、睾丸、卵巣などの細胞増殖が盛んな細胞にY-49が陽性であり、肝臓、肺、腎臓、甲状腺などではY-49陽性細胞は少数であり、脳ではY-49陽性細胞は殆ど見られなかった。悪性腫瘍細胞では殆どがY-49に陽性であり、悪性度が高いものほどY-49の陽性率が高かった。
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