| 研究課題/領域番号 |
11671641
|
|---|
| 研究機関 | 横浜市立大学 |
|---|
研究代表者 |
平原 史樹 横浜市立大学, 医学部, 教授 (30201734)
|
|---|
| 研究分担者 |
長嶋 洋治 横浜市立大学, 医学部, 助教授 (10217995)
宇田川 香織 横浜市立大学, 医学部, 助手 (20315815)
仲沢 経夫 横浜市立大学, 医学部, 講師 (90254169)
|
|---|
| キーワード | 卵巣がん / 浸潤・転移 / トリプシン / PP5 |
|---|
| 研究概要 |
本年度実施実験はトリプシンインヒビターに着目し以下の実験をおこなった。
[実験目的]PP5(Placental Protein 5)/TFPI-2(Tissue Factor Pathway Inhibitor-2)は、癌の浸潤、転移に関与するセリンプロテアーゼインヒビターであり、外因系凝固阻害因子TFPIのhomologueであることが知られているが、その生理的役割は未だ明らかではない。我々は既にPP5/TFPI-2がヒト胎盤において高発現し、mRNAがsyncytiotrophoblastに局在することをin situ hybridization法を用いて報告した。今回、PP5/TFPI-2蛋白の細胞内局在について、免疫電顕を用いて検討した。[方法]患者の同意のもとに、人工妊娠中絶時の妊娠初期の絨毛を採取し、PLP固定後、一次抗体として抗PP5/TFPI-2ポリクローナル抗体を、2次抗体はnanogoldにて標識された抗体を用いて免疫電顕を行った。また、妊娠初期絨毛をヘパリン添加溶液中で培養し、ヘパリン親和性により細胞表面より上清中に分泌促進されるPP5/TFPI-2をウエスタンブロット法により検出した。[成績]syncytiotrophoblastの粗面小胞体および微細絨毛表面にPP5/TFPI-2の集積が認められた。ヘパリン添加により溶液中にPP5/TFPI-2が検出された。[結論]PP5/TFPI-2はsyncytiotrophoblastで合成され絨毛間腔へと分泌されるが、絨毛表面で発現することにより、抗凝固作用をはじめとした血流調節維持の機構において重要な役割を果たしていることが示唆された。
次年度以降はさらに卵巣がんにおける意義について検討をかさねる。
|
