中耳炎発症最前線における分子生物学的動態の解明―不死化耳管上皮細胞培養系でのウイルス感染時の動的変化―

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11671688
• 研究機関: 大分医科大学
• 研究代表者: 鈴木 正志 大分医科大学, 医学部, 教授 (60211314)
• 研究分担者: 茂木 五郎 大分医科大学, 医学部, 副学長 (20035190)
• キーワード: 中耳粘膜 / 咽頭扁桃 / 中耳炎 / 粘膜免疫 / 経鼻ワクチン / サイトカイン / インフルエンザ菌 / ウイルス

研究概要

ラット耳管上皮細胞の初代培養系には既に成功したが、ラット鼓室粘膜細胞不死化技術を同耳管粘膜細胞の初代培養系に応用し試みた不死化には成功に至らなかった。しかしながら、この実験過程で派生したアイデアや確立した実験手技・技術によって、中耳粘膜およびそれに連なる鼻咽腔における種々の粘膜免疫学的・分子生物学的な静的・動的な解析を行うことができた。すなわち、中耳炎防御機構として粘膜免疫応答についてその一端を解明し、中耳炎に対するワクチン療法の有効性とその人への臨床応用への根拠となる知見を得た。1)中耳炎群では上咽頭のインフルエンザ菌検出率が高く上皮の網状化が強いことから、咽頭扁桃の中耳炎発症に関与するのは肥大度ではなくその炎症程度である。2)ウイルス感染により上咽頭粘膜レクチンは増強し中耳炎起炎菌の定着や増殖を促進させるために中耳炎が発症しやすい。3)インフルエンザ菌のエンドトキシンによる中耳炎はIL-1βによる中耳炎は類似しておりIL-1レセプター抗体により抑制され、中耳粘膜上皮はIL-1βを産生することから、中耳炎発症にはproinflammatory cytocineの一つであるIL-1βが深く関与している。4)未免疫の中耳粘膜にはB-1細胞、γδT細胞、IgA産生細胞、Th2型T細胞が認められ中耳粘膜が粘膜免疫実効組織としての性格を有し、経鼻ワクチン投与により抗原特異的IgAが中耳洗浄液に検出され、中耳粘膜内に抗原特異的IgA産生細胞が見られ、サイトカイン分析から抗原特異的Th2型T細胞が確認されたことより、中耳粘膜が実際に粘膜免疫の実効組織として機能する。5)経鼻粘膜免疫により中耳腔に注入したインフルエンザ菌の排除が促進され実験的中耳炎の発症を抑制することができる。

研究成果

• [文献書誌] Suzuki M., Watanabe T., Mogi G.: "Clinical, bacteriological, and histological study of adenoids in children."Am J Otolaryngol. 20(2). 85-90 (1999)
• [文献書誌] Hirano T., Kurono Y., Ichimiya I., Suzuki M., Mogi G.: "Effects of influenza A virus on lectin-binding patterns in murine nasopharyngeal mucosa and on bacterial colonization."Otolaryngology Head and Neck Surgery. 121(5). 616-621 (1999)
• [文献書誌] Kodama S., Suenaga S., Hirano T., Suzuki M., Mogi G.: "Induction of specific immunoglobulin A and Th2 immune responses to P6 outer membrane protein of nontypeable Haemophilus influenzae in middle ear mucosa by intranasal immunization"Infect Immun. 68(4). 2294-2300 (2000)
• [文献書誌] Suenaga S., Kodama S., Ueyama S., Suzuki M., Mogi G.: "Mucosal immunity of the middle ear : analysis at the single cell level"The Laryngoscope. 111. 291-296 (2001)
• [文献書誌] Sabirov A., Kodama S., Hirano T., Suzuki M., Mogi G.: "Intranasal immunization enhances clearanace of nontypeable Haemophilus influenzae and reduces stimulation of tumor necrosis factor alpha production in the murine model of otitis media"Infection and Immunity. 69(5). 2964-2971 (2001)
• [文献書誌] Watanabe T., Hirano T., Suzuki M., Kurono Y., Mogi G.: "Role of interleukin-1βin a murine model of otitis media with effusion"Ann Otol Rhinol Laryngol. 110(6). 574-580 (2001)
• [文献書誌] Kurono Y., Suzuki M., Mogi G.: "Mucosal vaccination against otitis media, New Frontiers in Immunobiology"(ed. by JE. Veldman, D. Passali, and D.J. Lim), 29-33, Kugler Publications, The Hague, The Netherlands, 2000. 29-33 (2000)