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2000 年度 実績報告書

ヒト頭頚部扁平上皮癌によるMHCクラスI拘束性CTLの導入と抗原エピトープの検索

研究課題

研究課題/領域番号 11671700
研究機関獨協医科大学

研究代表者

浅井 忠雄  獨協医科大学, 医学部, 講師 (90231860)

研究分担者 平林 秀樹  獨協医科大学, 医学部, 助教授 (00146185)
キーワード頭頚部扁平上皮癌 / MHCクラスI分子 / 癌関連抗原 / ELISPOT Assay / 抗原エピトープ
研究概要

平成11年度までの研究で、HLA-A2拘束性のCTLを数種類得ることができた。平成12年度はこれらCTLがMHCクラスI上のどのエピトープを認識しているかについて調べた。HLA-A2陽性の癌細胞を大量に培養し、癌細胞表面から癌関連抗原を得ようと試みた。まず酸にて処理する方法(acid-stripping)を行ったが、十分に癌関連抗原を得ることができなかった。メラノーマ細胞の場合、酸による処理で十分に癌関連抗原を得られたが、扁平上皮癌の場合は予想に反した結果であった。そこで、セファロースを用いて扁平上皮癌より癌関連抗原を抽出することを試みた。その結果十分に癌関連抗原を得ることができたので、HPLC(高速液体クロマトグラフィー)にて多数の分画にしたのち、すでに誘導したCTLがどの分画に反応しているかをELISPOT法にて調べた。するとCTLが特異的に反応する分画を数種類見いだすことができたので、Mass Spectrometryを行いアミノ酸配列の同定を試みた。その結果10ないし9個のアミノ酸配列を同定できた。1つはMet-Gly-Ala-Ala-Pro-Ser-(Leu^*lle)-(Leu^*lle)-Gly-(Leu^*lle)であり、他の一つは、Met-Gln-Ala-Pro-Ser-(Leu^*lle)-(Leu^*lle)-Gly-(Leu^*lle)であり、新しい腫瘍抗原と考えられた。当初の予定では、HLA-A2のみならず日本人に多いHLA-A24拘束性のCTLを誘導しHLA-A24特異的抗原エピトープを解析する予定であったが、HLA-A2のもののみ同定できたので、今後も続けて研究していくつもりである。
(Leu^*lle)は、Leuあるいはlleを意味する

  • 研究成果

    (1件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (1件)

  • [文献書誌] 浅井忠雄: "Evaluation of the Modified ELISPOT Assay for Gamma Interferon Production in Cancer Patients Receiving Antitumor Vaccines"Climical and Diagnostic Laboratory Immunology. Vol7.NO.2. 145-154 (2000)

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公開日: 2002-04-03   更新日: 2016-04-21  

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