| 研究課題/領域番号 |
11672225
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| 研究機関 | 北海道大学 |
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研究代表者 |
高橋 芳樹 北海道大学, 大学院・薬学研究科, 助手 (80292019)
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| 研究分担者 |
有吉 範高 北海道大学, 大学院・薬学研究科, 助教授 (00243957)
藤田 健一 北海道大学, 大学院・薬学研究科, 助手 (60281820)
中山 佳都夫 北海道大学, 大学院・薬学研究科, 助手 (20261323)
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| キーワード | 芳香族炭化水素受容体 / 異物応答配列 / DNAのメチル化 |
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| 研究概要 |
研究目的 : ダイオキシンや3-メチルコランスレンなどの芳香族炭化水素(AH)は、環境中に存在する毒性物質の代表であり、ホルモン撹乱物質として注目されている化学物質である。AHは、生体内に入ると芳香族炭化水素受容体(AhR)と結合し、さらに標的配列である異物応答配列(XRE)に結合することで、遺伝子の発現を調節していると考えられている。我々は、これまでAhRとXREの結合に対し、抑制的に働く因子、USF1を見いだした。そこで、本研究では、AhRの作用に抑制的に働く、USF1以外の因子や分子機構を探索することを目的とした。
研究実績 :
1.AhRとXREの相互作用を抑制する核内転写因子の探索 : 我々は、モルモットのDT-ジアホラーゼ遺伝子の上流に存在するXRE配列には、AhR以外の因子が結合し、AhRとXREの相互作用を抑制していることを見いだした。この因子を同定するために、モルモットのXRE配列を既知の転写因子の配列と比較したところ、この配列は、転写因子であるE12,E47,Sp1の結合配列と比較的高い相同性を示した。これらの因子に対する抗体を用いてスーパーシフトアッセイを行った結果、この因子には、Sp1が含まれていることが分かった。
2.メチル化を介したAhR応答遺伝子の発現抑制機構の解析 : AhRにより活性化されるヒトCYP1A1遺伝子の上流領域には、多くのメチル化を受ける可能性のあるCpG配列が存在していた。そこで、CYP1A1が誘導されないHeLa細胞を脱メチル化剤であるアザシチジンの存在下で4日間培養し、CYP1A1の誘導能に及ぼす影響を調べた。興味深いことに、脱メチル化剤で処理することにより、HeLa細胞でもAHによるCYP1A1の誘導的発現が認められた。DNAのメチル化もAhRによる遺伝子の活性化を制御していると考えられた。
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