1999 年度実績報告書

銅結合金属蛋白質アポ/ホロ比の定量:新しい細胞内酸化的傷害の指標

研究課題

研究課題/領域番号	11672314
研究機関	大阪医科大学
研究代表者	中西豊文大阪医科大学, 医学部, 講師 (10247843)
研究分担者	宮崎彩子大阪医科大学, 医学部, 助手 (20298772) 岸川匡彦大阪医科大学, 医学部, 助手 (40268199) 清水章大阪医科大学, 医学部, 教授 (00028581)
キーワード	ナノESIMS法 / アポ型 / ホロ型比 / 細胞内酸化的ストレス / 銅結合金属蛋白 / 活性酸素種 / 銅イオン毒性 / 神経変性疾患
研究概要	活性酸素種に代わる細胞内酸化的ストレスの重篤度を予測する指標としてスーパーオキサイド・ジスムターゼ(SOD-1)、メタロチオネイン(MT)等の銅結合メタロ蛋白のアポ型(銅非結合型)とホロ型(銅結合型)の比率を超高感度ナノスプレーイオン化質量分析法(ナノESMS法)にて定量し、関連疾息の診断・病態解明への手がかりを掴むため、先ず中性pH条件下でアポ型・ホロ型比を測定し得るナノESIMS法の分析条件を種々検討した。 1)市販SOD-1標品を用いて種々の条件(溶液pH、有機溶媒の量、噴霧温度)を変え、生体中に存在する形の2量体検出を試みたが、市販標品は非共有結合した分子が多量に存在するため、至適分析条件を決定する試みを一時中断し、ナノESIMS分析条件を検討することにした。 2)上記方法に代わる分析法として、誘導結合プラズマ質量分析法(ICPMS法)による精製蛋白中の金属イオンの定量法確立に方向を変更し、現在生体中より目的金属蛋白を分離・精製し分析条件を検討中である。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Saraswathi M,Nakanishi T,& Shimizu A.: "Relative quantification of glycated Cu-Zn superoxide dismutase in erythrocytes by electrospray ionization mass spectrometry"Biochim.Biophys.Acta. 1426・2. 483-490 (1999)
[文献書誌] Kishikawa M,Nakanishi T,Miyazaki A & Shimizu A.: "A simple and reliable method of detecting variant transthyretins by multidimensional liquid chromatography coupled to electrospray ionization/mass spectrometry"Amyloid:Int J Exp Clin Invest. 6・1. 48-53 (1999)
[文献書誌] Miyazaki A,Nakanishi T,Kishikawa M,Nakagawa T,Shimizu A,Mawjood AHM,Imai K,Aoki Y & Kikuchi M.: "Compound heterozygosity for b+-thalassemia-31(A->G)and a variant with low oxygan affinity,Hb Sagami[b139(H17)Asn->Thr]"Hemoglobin.. 23・3. 267-271 (1999)
[文献書誌] Kishikawa M,Nakanishi T,Miyazaki A & Shimizu A.: "Enhanced amyloidogenicity of sulfonated transthyretin in vitro,a hypothetical etiology of senile"Amyloid: Int J Exp Clin Invest. 6・3. 183-186 (1999)
[文献書誌] Kishikawa M,Nakanishi T,Miyazaki A,Shimizu A & Kusaka H.: "A new amyloidogenic transthyretin variant,[D38A],detected by electrospray ionization/mass spectrometry"Amyloid: Int J Exp Clin Invest. 6・4. 278-281 (1999)
[文献書誌] Nakanishi T & Shimizu A: "Ratio of the ion peak intensity of glycated and non-glycated hexapeptides from the N-terminal of hemoglobin β-chain by LC-ESI mass spectrometry"Jpn.Soc.Mas Spectrom.. 247・6. 389-391 (2000)

1999 年度 実績報告書

銅結合金属蛋白質アポ/ホロ比の定量:新しい細胞内酸化的傷害の指標

研究代表者

中西 豊文 大阪医科大学, 医学部, 講師 (10247843)

研究成果

[文献書誌] Saraswathi M,Nakanishi T,& Shimizu A.: "Relative quantification of glycated Cu-Zn superoxide dismutase in erythrocytes by electrospray ionization mass spectrometry"Biochim.Biophys.Acta. 1426・2. 483-490 (1999)

[文献書誌] Kishikawa M,Nakanishi T,Miyazaki A & Shimizu A.: "A simple and reliable method of detecting variant transthyretins by multidimensional liquid chromatography coupled to electrospray ionization/mass spectrometry"Amyloid:Int J Exp Clin Invest. 6・1. 48-53 (1999)

[文献書誌] Miyazaki A,Nakanishi T,Kishikawa M,Nakagawa T,Shimizu A,Mawjood AHM,Imai K,Aoki Y & Kikuchi M.: "Compound heterozygosity for b+-thalassemia-31(A->G)and a variant with low oxygan affinity,Hb Sagami[b139(H17)Asn->Thr]"Hemoglobin.. 23・3. 267-271 (1999)

[文献書誌] Kishikawa M,Nakanishi T,Miyazaki A & Shimizu A.: "Enhanced amyloidogenicity of sulfonated transthyretin in vitro,a hypothetical etiology of senile"Amyloid: Int J Exp Clin Invest. 6・3. 183-186 (1999)

[文献書誌] Kishikawa M,Nakanishi T,Miyazaki A,Shimizu A & Kusaka H.: "A new amyloidogenic transthyretin variant,[D38A],detected by electrospray ionization/mass spectrometry"Amyloid: Int J Exp Clin Invest. 6・4. 278-281 (1999)

[文献書誌] Nakanishi T & Shimizu A: "Ratio of the ion peak intensity of glycated and non-glycated hexapeptides from the N-terminal of hemoglobin β-chain by LC-ESI mass spectrometry"Jpn.Soc.Mas Spectrom.. 247・6. 389-391 (2000)

1999 年度実績報告書

中西豊文大阪医科大学, 医学部, 講師 (10247843)