放射線感受性を調節する転写因子遺伝子に関する研究

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11680550
• 研究機関: 広島大学
• 研究代表者: 加藤 修 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 助教授 (90214361)
• 研究分担者: 小林 正夫 広島大学, 教育学部, 教授 (00162016)
• キーワード: アポトーシス / 電離放射線 / zinc finger / 転写因子

研究概要

我々は、電離放射線曝露により発現上昇し、強制発現させた細胞において放射線誘導アポトーシスを増強させる作用を持つzinc finger型新規遺伝子ZK1をクローニングした(Katoh,O.,et al BBRC,249:595・600.1998)。この放射線誘導アポトーシスを増強させる機能を持つZK1遺伝子、およびその遺伝子産物の機能について以下の点を明らかにした.
1.ZK1遺伝子産物は、導入した全ての細胞株(とト上顎がん由来の扁平上皮がん細胞株SCC-TF,子宮がん由来細胞株HeLa、卵巣がん由来細胞株MCAS、白血病細胞株U937)において、その放射線感受性を数倍以上増加させた。
2.ZK1遺伝子産物は、電離放射線のみならずH_2O_2や温熱刺激(42℃)などのストレス、あるいは抗腫瘍剤であるVP-16やシスプラチンによる細胞死を増強させた.
3.ZK1蛋白が結合しうるDNA配列を同定するために、ZK1遺伝子を原核細胞発現ベクターpGEX-4T-1に導入し、リコンビナントGST-ZK1融合蛋白を作製し、任意の配列を持った20塩基をSK,KSプライマーにて挟み込んだオリゴヌクレオチドと結合させ、EMSA法を繰り返し行った。その結果、CCCAC等のGCリッチな配列に特に結合しうることが明らかになった。
ZK1遺伝子産物は、種々の刺激によるアポトーシスのシグナル伝達経路の共通する部分に働いている可能性が高い。また直接DNAと結合し、転写調節因子として働いている可能性が極めて高いので、今後は、アポトーシスのシグナル伝達経路に関与する標的遺伝子の同定を試みていく予定である。

研究成果

• [文献書誌] Saiki,Y.: "Human EVI9,a homologue of the mouse myeloid leukemia gene, is expressed in the hematopoietic progenitors and down-regulated during myeloid differentiation of HL60 cells."Genomics,. 70. 387-391 (2000)
• [文献書誌] Nakamura,K.: "Abonormalities of primitive myeloid progenitor cells expressing granulocyte colony-stimulating factor receptor in patients with severe congenital neutropenia."Blood. 96. 4366-4369 (2000)
• [文献書誌] Oguri,T.: "Glutathione S-transferase-pi gene expression and platinum drug exposure in human lung cancer."Cancer Lett.. 156. 93-99 (2000)
• [文献書誌] Oguri,T.: "Increased expression of the MRP5 gene is associated with exposure platinum drugs in lung cancer."Int.J.Cancer,. 86. 95-100 (2000)
• [文献書誌] Watanabe,H.: "Grafting of stomach tissue into the duodenum in F344 rats results in chimeric crypts and tumor development"J.Exp.Clin.Cancer.Res.. 19. 207-210 (2000)
• [文献書誌] Masaoka,Y.: "Inhibitory effects of crude salts on the induction and development of colonic aberrant crypt foci in F-344 rats given development"Nutr.Cancer. 37. 78-81 (2000)
• [文献書誌] Kuramoto,K.: "ZK7,a novel zinc finger gene, is induced by vascular endothelial growth factor and inhibits apoptotic cell death in hematopoietic cells."Cancer Research. 60. 425-430 (2000)
• [文献書誌] Hirata,S.: "Expression of drug resisitance-related genes in head and neck squamous cell carcinoma and normal mucosa."Japanese Journal of Cancer Research. 91. 84-90 (2000)
• [文献書誌] Konishi,N.: "Defective proliferation of primitive myeloid progenitor cells in patients with severe congenital neutropenia."Blood. 94. 4077-4083 (1999)
• [文献書誌] Oguri,T.: "Induction of gamma-glutamyl cycteine synthetase gene expression by platinum drugs in peripheral mononuclear cells of lung cancer patients."Annals of Oncology. 10. 455-460 (1999)