| 研究概要 |
1)ニワトリleftyの単離
ニワトリleftyの単離を目的として、mouse、humanのleftyを比較して保存されているアミノ酸の領域をもとに縮重したプライマーを合成し、ニワトリ初期胚から調整したtotal RNAを鋳型に用い、RT-PCRを行い、いくつかのcDNAクーロンを得た。その中のひとつはmouse,humanのleftyと相同性が高かった。その発現様式をWhole-mount in situ hybridization法を用いて、解析したところ、st5から神経管の将来神経底になるところの左側、st7では左側の側板中胚葉に発現しており、相同性と併せて考えて、この遺伝子はニワトリのleftyであると結論した。
2)左右軸形成に関与する新規遺伝子の同定とその発現様式の解析
左右軸形成に関与する新規遺伝子の単離を目的として、st4,st5、st7の時期の左右の胚を用いて、cDNAライブラリイーを作製する。左右から作製されたcDNAを用い、サブトラクション法を行い、右特異的、左特異的な遺伝子の同定を行う。サブトラクション法で固定された遺伝子が左右特異的に時期特異的に発現するのかをwholeーmount in situ hybridization法により、詳細に調べる。時間軸に沿った空間的発現様式を解析することで、遺伝子カスケードが予測できると思われる。現在解析中である。
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