進行性腎障害に対する遺伝子治療

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11694275
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 今井 圓裕 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (00223305)
• 研究分担者: 竹中 優 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (20222101)
• キーワード: 遺伝子治療 / 腎炎 / HVJリポソーム法 / インターロイキン10

研究概要

糸球体障害には遊走してくる単球・マクロファージとメサンギウム細胞の応答によるIL-1,TNFα,TGF-βなどの増殖因子、サイトカインの産生増加が重要であり、これを抑制することにより腎糸球体障害を軽減できる可能性がある。IL-10はマクロファージから産生されるTNFαや酸素ラジカルの放出を抑制する最も強力な因子である。このIL-10をin vivoで発現させる遺伝子導入系を開発し、実験腎炎モデルラットでその抗蛋白尿効果を検討した。まず、レトロウイルスベクターにヒトIL-10遺伝子を組み込み、培養メサンギウム細胞に導入した。このメサンギウム細胞でIL-10が発現することを確認した後、抗基底膜抗体糸球体腎炎モデルラットの腎動脈から注入した。その結果、メサンギウム細胞を導入した腎臓から単離した糸球体でのIL-10の発現が認められ、尿蛋白も減少した。この方法ではメサンギウム細胞が糸球体毛細血管内腔にとどまり、非生理的なため筋肉内にベクターを注入し、全身的にIL-10濃度を上げることより糸球体腎炎に対する効果を検討した。IL-10遺伝子発現ベクターはpCAGGSを用いた。HVJ-リポソームを用いて筋肉に導入したこのベクターからIL-10が産生され、尿蛋白が抑制されることを確認した。この結果は、IL-10が糸球体腎炎の進展を抑制する可能性があることを示唆するものである。

研究成果

• [文献書誌] Band L,Fouqueray B,Bellocq A: "Cytokines and hormones with anti-inflammatory effects : new tools for therapeutic intervention"Cuur Opin Nephrol Hypertens. 10. 49-54 (2001)
• [文献書誌] Isaka Y,Tsujie M,Ando Y,Nakamura H,Kanada Y,Imai E, et al.: "Introduction of transforming grownth factor-β1 antisense digodeoxynucleotidies into renal interstitial fibroblasts blocks interstitial fibrosis inunilateral ureteral obstraction"Kidney Int. 58. 1885-1892 (2000)
• [文献書誌] Tsujie M,Isaka Y,Ando Y,Akagi Y,Kaneda Y,Ueda N,Imai E,Hori M.: "Gene transfer targeting interstitial fibroblasts by the artificial viral envelope type hemagglutinating virus of Japan liposome method"Kidney Int. 57. 1973-1980 (2000)
• [文献書誌] Imai E, et al.: "Gene therapy by transforming growth factor-beta receptor-Ig G Fc chimera suppressed extracellular matrix accumulation in experimental glomerulonephritis"Kidney Int. 55. 465-475 (1999)