新規神経伝達物質としてのATPの慢性疼痛への関与とその分子機構に関する研究

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11770050
• 研究機関: 福岡大学
• 研究代表者: 上野 伸哉 福岡大学, 医学部, 講師 (00312158)
• キーワード: ATP / プリン受容体 / アストロサイト / 細胞内カルシウムイオン / ATP放出 / パッチクランプ / 定量PCR / 痛み

研究概要

1)[定量PCR];ATP受容体のmRNAレベルでの発現変化を捉えるため、定量PCR系(プライマー設計、PCR条件を含む)を確立した。この系を利用して、ラットDRG,脳各部位におけるP2X受容体サブタイプの発現変化を少量サンプルにて可能とした。
2)[疼痛モデル];ホルマリン足底皮下内投与による疼痛モデルにおいて、ATP受容体が疼痛発現に関与していること、またP2X3受容体のアゴニストを脊髄腔内投与によって熱刺激に対する感受性の増加がみられ、疼痛伝達の脊髄レベルでの増強がATP受容体を介して引き起こされることが明らかとなった。これら疼痛モデルでのATP受容体発現の変化に関しては、現在検索中である。
3)[アストロサイトからのATP放出];中枢神経系における細胞外ATPの供給源として、アストロサイトの役割を培養細胞を用い検討中である。生直後ラット大脳皮質から、アストロサイトを精製、培養し、低浸透圧刺激によるATP放出と細胞内Ca動員機構との関連をルシフェリン-ルシフェラーゼ法、Fura2をそれぞれ用い検討中である。一方、ATP放出が細胞容量感受性C1チャンネルとも関連していることを示唆するデータもみられ、放出機構への役割を明らかにする予定である。

研究成果

• [文献書誌] Inoue,K et al.: "Signal transduction through ATP receptors in brain and the development of new drugs"Nippon Yakurigaku Zasshi. 112・suppl1. 36P-40P (1998)
• [文献書誌] Ueno,S et al.: "Cell type-specific ATP-activated responses in rat dorsal root ganglion neurons"Br.J.Pharmacol.. 126・2. 429-436 (1999)
• [文献書誌] Tsuda,M et al.: "In vivo pathway of thermal hyperalgesia by intrathecal administration of α,β-methylene ATP in mouse spinal cord: involvement of the glutamate-NMDA receptor system"Br.J.Pharmacol.. 127・2. 449-456 (1999)
• [文献書誌] Tsuda,M et al.: "Evidence for the involvement of spinal endogenous ATP and P2X receptors in nociceptive responses caused by formalin and capsaicin in mice"Br.J.Pharmacol.. 128・7. 1497-1504 (1999)
• [文献書誌] Tomioka,A et al.: "Propofol potentiates ATP-activated currents of recombinant P2X4 receptor channels expressed in human embryonic kidney 293 cells."Neuroscience Letter. (in press).
• [文献書誌] Inoue,K et al.: "Progress in Brain Research Vol.120 chapter 16 193-206"Elsevier Science BV. 432 (1999)