DNAメチル化によって発現制御された胃がんの発生・進展に寄与する遺伝子の単離

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11770108
• 研究機関: 国立がんセンター
• 研究代表者: 金井 弥栄 国立がんセンター, 研究所・病理部, 室長 (00260315)
• キーワード: DNAメチル化 / HIC-1 / ヘテロ接合性喪失 / 前がん状態、胃がん / 慢性胃炎 / 腸上皮化生

研究概要

ヒトがんにおけるDNAメチル化異常は、遺伝子発現異常や染色体構造変化を惹起することが知られている。メチル化亢進によって不活化されると予測されるがん抑制遺伝子HIC-1(hypermethylated in cancer)は、D17S5 locusに位置する。本研究では胃がん発生におけるDNAメチル化異常の意義の解明を試みた。胃がん症例手術材料凍結標本より病理組織学的検討の後にDNAを抽出し、メチル化の影響を受ける制限酵素Not Iによるサザン法を行い、非胃がん症例と比較してCpGメチル化の状態を評価した。同1ocusにおけるヘテロ接合性喪失(LOH)も併せて検討した。非胃がん症例の組織学的に著変のない胃粘膜には、D17S5 locusにおけるメチル化亢進を認めなかった。胃がん症例においては、組織学的に著変のない胃粘膜(15%)、慢性胃炎を呈する胃粘膜(13%)、腸上皮化生巣(25%)にメチル化亢進を認めた。非胃がん症例においても、腸上皮化生巣にはメチル化亢進がみられた。胃がんの45%にメチル化亢進がみられたが、高分化・中分化・低分化腺がんにおける亢進の頻度はそれぞれ0・25・56%であった。がん部においてメチル化亢進が認められなかった症例・認められた症例のそれぞれ21%・47%において、同locusのLOHがみられた。D17S5 locusのDNAメチル化亢進は腸上皮化生を含む前がん状態において既に検出され、LOHの誘因のひとつとなりあるいはHIC-1遺伝子発現低下などを介して、胃がんの発生に寄与する可能性があると考えられた。胃がん発生におけるDNAメチル化の寄与の可能性が示されたので、現在、脱メチル化剤処理した胃がん細胞を用いたdifferential display法により、胃がんの発生・進展に寄与する遺伝子の単離の試みを継続している。

研究成果

• [文献書誌] Yae Kanai, et al.: "Reduced mRNA expression of the DNA demethylase, MBD2, in human colorectal and stomach cancers"Biochem. Biophys. Res. Commn.. 264. 962-966 (1999)
• [文献書誌] Yae Kanai, et al.: "DNA hypermethylation at the D17S5 locus and reduced HIC-1 mRNA expression are associated with hepatocarcinogenesis"Hepatology. 29. 703-709 (1999)
• [文献書誌] Yae Kanai, et al.: "Aberrant DNA methylation precedes loss of heterozygosity on chromosome 16 in chronic hepatitis and liver cirrhosis"Cancer lett.. 148. 73-80 (2000)
• [文献書誌] Tohru Harabayashi, Yae Kanai, et al.: "Reduction of integrin β4 and enhanced migration on laminin in association with intraepithelial spreading of urinary bladder carcinomas"J. Urol.. 161. 1364-1371 (1999)
• [文献書誌] Yutaka Kondo, Yae Kanai, et al.: "Microsatellite instability associated with hepatocarcinogenesis"J. Hepatol.. 31. 529-536 (1999)
• [文献書誌] Atsushi Saito, Yae Kanai, et al.: "Disruption of E-cadherin-mediated cell adhesion systems in young patients with gastric cancers"Jpn. J. Cancer Res.. 90. 993-999 (1999)
• [文献書誌] Atsushi Ochiai, Yae Kanai, et al.: "Multiple mechanisms for inactivation of E-cadherin cell adhesion system in cancer. In : Epithelial Morphogenesis in Development and Disease"Harwood Academic Publishers gmbh, Amsterdam. 427-444 (1999)