動物細胞由来のHTLV-Iの高い感染性の解析およびウイルス感染における糖鎖の役割

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11770154
• 研究機関: 群馬大学
• 研究代表者: 原口 裕次 群馬大学, 医学部, 助手 (80272251)
• キーワード: HTLV-I / 糖鎖

研究概要

1.種々の哺乳動物(ネコ、ウサギ、マウス、ブタ、ヒト)由来の細胞株に、HTLV-Iが持続感染したヒトT細胞株(2M、SI-5)を混合培養した。その結果、HTLV-Iが持続感染した、6種類のネコ由来細胞株(8C/HTLV-I_<2M>、8C/HTLV-I_<SI-5>、PG-4/HTLV-I_<SI-5>、PG-4/HTLV-I_<2M>、G-355/HTLV-I_<SI-5>、G-355/HTLV-I_<2M>)および1種類のヒト由来細胞株(HOS/HTLV-I_<SI-5>)が得られた。
2.HTLV-Iの感染症を、HTLV-Iに特異的なプライマーを用いたcell-free HTLV-I-PCR assayを用い調べた所、ウサギ細胞株(Ra-1)および1の実験で得た、6種類のネコ細胞株由来のHTLV-Iは、ヒト細胞株(HOS/PL、HOS/HTLV-I_<SI-5>、MT-2、C91/PL)由来のHTLV-Iの感染症の100-1,000倍であった。
3.ネコ細胞株由来のHTLV-Iは、末端αガラクトシル基に結合するレクチン(BS-IB4)で強く感染阻害され、また、ネコおよびヒト細胞株由来のHTLV-Iは、末端ガラクトシル基に結合するレクチン(ECA)で感染阻害された。ウシ白血病ウイルスはこれらのレクチンで感染阻害されなかった。
4.ヒト細胞株およびネコ細胞株由来のHTLV-Iを、末端ガラクトシル基を切断する酵素(αガラクトシダーゼ、βガラクトシダーゼ)で処理すると感染性の低下が認められた。また、末端シアル酸残基を切断する酵素(シアリダーゼ)で処理すると、逆に感染性の上昇が認められた。
5・ブタ細胞株よりクローニングした、αガラクトシルトランスフェラーゼ遺伝子を発現ベクターpcDNA3-neoおよびpMX-puroに導入した。次に、αガラクトシルトランスフェラーゼ遺伝子をHTLV-Iが持続感染したヒト細胞株(HOS/HTLV-I_<SI-5>)に導入して安定発現細胞株の作成に成功した。

研究成果

• [文献書誌] Nobuaki Shimizu et al: "Changes in and discrepancies between cell tropisms and coreceptor uses of human immunodeficiency virus type 1 induced by simple point mutations at the V3 tip of the env protein"Virology. 259. 324-333 (1999)
• [文献書誌] Yuji Haraguchi et al: "Inhibition of HIV-1 infection by zinc qroup metal compounds"Antiviral Research. 43. 123-133 (1999)
• [文献書誌] Deyu Fang et al: "Heat shock cognate protein 70 is a cell fusion-enhancing factor but not an entry factor for human T-cell lymphotropic virus type 1"Biochemical and Biophysical Research Communications. 261. 357-363 (1999)
• [文献書誌] A. Jinno et al: "Inhibition of cell-free human T-cell leukemia virus type 1 infection at a postbinding step by the synthetic peptide derived from an ectodomain of the gp21 transmembrane glycoprotein"Journal of Virology. 73、11. 9683-9689 (1999)